Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-Lck-Y505 para WB, IP, ELISA - P06239

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Lck

• A tirosina-proteína quinase Lck (p56-LCK) é uma quinase de tirosina não receptora da família Src, essencial para a seleção e maturação de células T em desenvolvimento no timo e para a função de células T maduras. Referências relacionadas: PMID:2470098
• A Lck desempenha um papel fundamental na transdução de sinal ligada ao receptor de antígeno de células T (TCR). Ela está constitutivamente associada às caudas citoplasmáticas dos correceptores CD4 e CD8 e, após o engajamento do TCR, fosforila motivos ITAM no complexo TCR-CD3, iniciando a sinalização. Referências relacionadas: PMID:2470098
• Uma vez ativada, a Lck fosforila e ativa a quinase a jusante ZAP70, levando ao recrutamento de moléculas de sinalização e à produção de linfoquinas. Referências relacionadas: PMID:2470098
• A Lck também contribui para a sinalização por meio de outros receptores, incluindo a hiperfosforilação mediada por CD2 e a via do receptor de IL2, que controla a proliferação de células T. Referências relacionadas: PMID:2470098
• Substratos adicionais da Lck incluem RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH e TYROBP, e ela interage com FYB2. Referências relacionadas: PMID:27335501
• A Lck localiza-se na membrana celular e no citoplasma (citosol), e é expressa especificamente em células linfoides.
• Modificações pós-traducionais incluem miristoilação e palmitoilação N-terminal para ancoragem à membrana, e fosforilação regulatória em tirosinas-chave, incluindo Y505 (inibitória). Contém domínios SH2 e SH3 e é classificada como um proto-oncogene e uma quinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosfo sintético correspondente à região Y505 da Lck humana; ele foi projetado para reconhecer especificamente a Lck fosforilada em Y505.
• Para Western blot (WB), considere o uso de lisados celulares ou teciduais de linhagens de células T humanas (ex.: Jurkat) com inibidores de fosfatase apropriados para preservar a fosforilação. Espera-se uma banda em torno de 58 kDa.
• A imunoprecipitação (IP) pode exigir otimização da concentração de anticorpo e das condições do tampão de lise; verifique as proteínas eluídas por WB.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar fosfo-Lck-Y505 em ensaios baseados em peptídeos; as condições de revestimento da placa e detecção devem ser determinadas empiricamente.
• Sempre valide o anticorpo no sistema de amostra relevante e no contexto da aplicação, pois o desempenho pode variar com as condições experimentais.

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