Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-MAP2K1-S217/MAP2K2-S221 para WB, ELISA - Q02750 / P36507

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MAP2K1/MAP2K2 (MEK1/MEK2)

• MAP2K1 (MEK1) e MAP2K2 (MEK2) são proteínas quinases de especificidade dupla que servem como componentes essenciais da via de transdução de sinal da quinase MAP, especificamente a cascata MAPK/ERK.
• Após estimulação extracelular, RAS ativa RAF1, que por sua vez fosforila e ativa MAP2K1/2 em resíduos de serina conservados (S217 em MEK1, S221 em MEK2), desencadeando a fosforilação a jusante de ERK1/2 em um motivo Thr-Glu-Tyr.
• ERK1/2 ativado então transloca para o núcleo para regular fatores de transcrição, controlando processos como crescimento celular, adesão, sobrevivência, diferenciação, metabolismo e reorganizações do citoesqueleto.
• MAP2K1 também participa da ativação de BRAF dependente de KSR1/2, promovendo a dimerização KSR-BRAF, o que libera interações inibitórias e aumenta a atividade quinase de BRAF. Referências relacionadas: PMID:29433126
• A cascata MAPK/ERK influencia a dinâmica endossomal, o processamento de lisossomos e a fragmentação do Golgi durante a mitose, mediada em parte pela localização subcelular de MAP2K1 no citoplasma, centrossomo, polo do fuso, núcleo e membrana.
• MAP2K1 é amplamente expresso em tecidos humanos, mas apresenta níveis extremamente baixos no cérebro, consistente com seu papel onipresente na sinalização mitogênica.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem fosforilação em sítios de ativação, acetilação e mutações associadas a doenças ligadas a cardiomiopatia, displasia ectodérmica e deficiência intelectual (segundo palavras-chave do UniProt).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que abrange S217 de MAP2K1 e S221 de MAP2K2, sugerindo que o anticorpo reconhece preferencialmente as formas ativadas (fosforiladas) de MEK1/2.
• Para Western blot, prepare lisados de células privadas de soro estimuladas com fatores de crescimento (por exemplo, EGF, insulina) para induzir uma fosforilação robusta de MEK1/2; valide a especificidade comparando com anticorpos totais de MEK1/2 ou tratando as amostras com fosfatase lambda.
• Os pesos moleculares esperados são de ~40–44 kDa para MAP2K1 e ~45 kDa para MAP2K2; o splicing alternativo pode gerar bandas adicionais.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção, mas a diluição ideal e o emparelhamento devem ser determinados empiricamente no sistema de ensaio final.

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