Fosfo-MAP2K4-S257 pAb de Coelho para Western Blot, ELISA - P45985

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MAP2K4

• Proteína quinase de especificidade dupla que atua como um componente essencial da via de transdução de sinal da quinase MAP.
• Componente essencial da via de sinalização da quinase de proteína ativada por estresse / quinase N-terminal c-Jun (SAP/JNK); fosforila e ativa diretamente MAPK8/JNK1, MAPK9/JNK2 e MAPK10/JNK3.
• Juntamente com MAP2K7/MKK7, é uma das únicas quinases conhecidas que ativam diretamente JNKs; MAP2K4 fosforila preferencialmente o resíduo Tyr dentro do motivo Thr-Pro-Tyr.
• Além disso, ativa quinases p38 MAP (MAPK11, MAPK12, MAPK13, MAPK14), ao contrário de MAP2K7, que visa exclusivamente JNKs.
• Necessária para manter a homeostase linfóide periférica.
• Participa da sinalização de morte mitocondrial, promovendo a liberação de citocromo c e apoptose.
• A localização subcelular inclui tanto o citoplasma quanto o núcleo.
• Amplamente expressa no músculo esquelético, com ampla distribuição em outros tecidos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Confirme a especificidade fosfo-específica tratando as amostras com lambda fosfatase ou por co-incubação com peptídeo bloqueador não fosforilado.
• Inclua lisatos de controle positivo e negativo apropriados (por exemplo, células estimuladas versus não estimuladas) para validar o sinal de fosforilação no WB.
• Para amostras de camundongo ou rato, verifique a reatividade cruzada e o alinhamento da sequência no local de fosforilação antes dos ensaios quantitativos.
• Determine a diluição ideal do anticorpo para cada aplicação experimentalmente; as diluições iniciais típicas podem ser encontradas na ficha técnica do anticorpo.
• Em ELISA, garanta um revestimento consistente da placa e reagentes de detecção para minimizar a variabilidade na quantificação de fosforilação.

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