Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-MARCKS-S162 para WB, ELISA - P29966

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MARCKS

• MARCKS (Substrato da C-quinase rica em alanina miristoilada), também conhecido como MACS, 80K-L ou PKCSL, é uma proteína intracelular amplamente expressa que serve como um substrato principal para a proteína quinase C (PKC).
• Desempenha um papel central na modulação do citoesqueleto de actina, regulando assim processos como quimiotaxia, motilidade, adesão celular, fagocitose e exocitose (PubMed:23704996, PubMed:36009319).

Referências relacionadas: PMID:23704996 PMID:36009319

• Em células quiescentes, o MARCKS sequestra o fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) em rafts lipídicos da membrana plasmática; a fosforilação pela PKC reverte esse sequestro, promovendo a exocitose (PubMed:23704996).

Referências relacionadas: PMID:23704996

• Durante a inflamação, o MARCKS facilita a migração e adesão de células inflamatórias e aumenta a secreção de citocinas como TNF, particularmente em macrófagos (PubMed:37949888).

Referências relacionadas: PMID:37949888

• A proteína está envolvida na formação de espécies reativas de oxigênio (ROS) intracelulares induzidas por bactérias em células monocíticas.
• O MARCKS localiza-se na membrana celular, citoplasma e citoesqueleto, refletindo seus papéis dinâmicos nas interações membrana-citoesqueleto.
• Detectado em espermatozoides, sugerindo funções na fertilidade masculina e na motilidade espermática.
• Modificações pós-traducionais incluem miristoilação N-terminal, acetilação e extensa fosforilação; também contém domínios de ligação à actina e calmodulina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo foi gerado contra um peptídeo específico de fosfo circundante ao Ser162, recomenda-se confirmar a especificidade de fosforilação usando amostras tratadas com fosfatase ou comparando sinais com um anticorpo pan-MARCKS no WB.
• Para WB, considere usar lisados de células inteiras de células estimuladas vs. não estimuladas (por exemplo, tratamento com PMA para ativar a PKC) para validar a detecção da forma fosforilada.
• Na ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar Phospho-MARCKS-S162 em formatos de revestimento com peptídeo ou proteína; aconselham-se agentes de bloqueio e controles apropriados.
• As concentrações de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente pelo usuário final para cada ensaio e tipo de amostra específicos.

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