Fosfo-MDM2-S260 Coelho pAb para WB, ELISA - Q00987

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MDM2

• MDM2 é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 que tem como alvo principal a p53/TP53 para ubiquitinação e degradação proteassomal, inibindo a parada do ciclo celular e apoptose mediadas por p53. Referências relacionadas: PMID:29681526
• Também ubiquitina outros substratos, incluindo IGF1R, SNAI1, DYRK2 e DCX, regulando processos como degradação de receptores, desenvolvimento neuronal e migração celular. Referências relacionadas: PMID:12821780, PMID:15053880, PMID:15195100
• MDM2 regula negativamente o NDUFS1, levando à diminuição da respiração mitocondrial, aumento do estresse oxidativo e comprometimento com a via mitocondrial da apoptose. Referências relacionadas: PMID:30879903
• Subcelularmente, o MDM2 é encontrado no núcleo, nucleoplasma, citoplasma e nucléolo, deslocando-se entre compartimentos para exercer suas diversas funções.
• MDM2 é uma fosfoproteína com um domínio de dedo de zinco do tipo RING; a fosforilação em múltiplos sítios, incluindo S260, pode modular sua atividade, estabilidade e interações com p53 e outros parceiros.
• Quanto à especificidade tecidual, o MDM2 é expresso de forma ubíqua, mas certos isoformas de splicing (Mdm2-A a -G) são observados em uma variedade de cânceres, embora ausentes em tecidos normais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Use inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação em S260.
• Para WB, considere bloquear com peptídeo não fosforilado ou tratar amostras com fosfatase para confirmar a especificidade para fosfo.
• Valide o anticorpo em linhagens celulares humanas ou tecidos com expressão e estado de fosforilação conhecidos do MDM2 (por exemplo, células cancerígenas com p53 de tipo selvagem sob estresse genotóxico).
• Para ELISA, garanta que o sistema de captura e detecção mantenha o epítopo fosforilado e evite incubações prolongadas que possam levar à desfosforilação.

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