Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-MEK1-T292 para WB, ELISA - Q02750

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MEK1

• O MEK1 (MAP2K1) é uma proteína quinase de especificidade dupla essencial para a via de sinalização MAPK/ERK, catalisando a fosforilação de resíduos de treonina e tirosina em ERK1/2 (MAPK3/1) para propagar sinais a jusante.
• Opera a jusante de RAS e RAF1, transduzindo sinais de fatores de crescimento, citocinas e hormônios para controlar o crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação.
• O MEK1 também promove a ativação do BRAF ao associar-se com proteínas de andaime KSR1 ou KSR2, um mecanismo que alivia a autoinibição e aumenta a dimerização. Referências relacionadas: PMID:29433126
• A proteína localiza-se em múltiplos sítios subcelulares, incluindo o citoplasma, centrossomo, polo do fuso, núcleo e membrana, facilitando a sua participação em diversos contextos de sinalização e mitose.
• O MEK1 é amplamente expresso com abundância muito baixa no cérebro, consistente com o seu papel onipresente na regulação de processos celulares fundamentais.
• Modificações pós-traducionais, como fosforilação (por exemplo, em Thr292) e acetilação, ajustam finamente a atividade do MEK1, e mutações estão associadas a cardiomiopatia, displasia ectodérmica e deficiência intelectual.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor de Thr292 de MEK1 humano (UniProt Q02750). Para Western blot, considere incluir inibidores de fosfatases nos tampões de lise celular para manter sinais dependentes de fosforilação.
• Em ELISA, o revestimento com antígeno do peptídeo fosforilado pode exigir otimização do tampão de revestimento e das condições de bloqueio para garantir a especificidade fosfo.
• Dada a alta conservação do MEK1 entre humanos, camundongos e ratos, espera-se que este anticorpo detecte a forma fosforilada em todas as três espécies; no entanto, a reatividade cruzada deve ser confirmada experimentalmente nas espécies e tipos de tecidos/células relevantes.
• Para WB, o peso molecular previsto é de aproximadamente 43 kDa. Valide o tamanho da banda usando controles de sítios fosfo apropriados (por exemplo, tratamento com fosfatase lambda) para confirmar a especificidade.
• Como um anticorpo específico para fosfo, a consistência de lote para lote é crítica para aplicações quantitativas como ELISA. Recomendamos titulação e testes paralelos com controles de peptídeo não fosforilado para minimizar a variabilidade.

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