Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-MEK1-T292 para WB e ELISA - Q02750

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MEK1

• MEK1 (MAP2K1), também conhecido como PRKMK1, MKK1, é uma proteína quinase de especificidade dupla de 43 kDa ativada por mitógenos que serve como uma quinase essencial na cascata de transdução de sinal RAS-RAF-MEK-ERK.
• Após a ativação por RAF1, o MEK1 fosforila tanto um resíduo de treonina quanto um resíduo de tirosina dentro do motivo Thr-Glu-Tyr do ERK1 (MAPK3) e ERK2 (MAPK1), levando à sua ativação e eventos de sinalização a jusante que regulam o crescimento celular, adesão, sobrevivência, diferenciação, transcrição, metabolismo e reorganizações do citoesqueleto.
• De maneira dependente de KSR1 ou KSR2, o MEK1 também ativa o BRAF liberando interações inibitórias intramoleculares e promovendo a dimerização do BRAF. Referências relacionadas: PMID:29433126
• O MEK1 está envolvido na exportação nuclear do receptor gama ativado por proliferador de peroxissomo (PPARG) e participa na regulação da dinâmica endossomal, incluindo o processamento de lisossomos, a ciclagem de endossomos através do compartimento de reciclagem perinuclear (PNRC) e a fragmentação do aparelho de Golgi durante a mitose.
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o citoplasma, citoesqueleto (centrossomo e corpo do polo do fuso), núcleo e membrana, consistente com seus diversos papéis funcionais.
• O MEK1 é amplamente expresso em tecidos, com níveis extremamente baixos detectados no cérebro.
• Modificações pós-traducionais, como fosforilação na treonina 292 (e outros locais), acetilação e splicing alternativo regulam sua atividade e interações. Mutações no MAP2K1 estão associadas a doenças como cardiomiopatia, displasia ectodérmica e deficiência intelectual (distúrbios do espectro da síndrome de Noonan).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético em torno de T292 de MEK1 humano; este anticorpo foi projetado para reconhecer especificamente a forma fosforilada. Trate as células com estímulos apropriados (por exemplo, fatores de crescimento) e inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise para preservar a fosforilação.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 43 kDa. Use um gel SDS-PAGE redutor e valide a detecção com controles positivos e negativos (por exemplo, lisatos tratados com fosfatase ou bloqueio com não-fosfopeptídeo).
• O anticorpo demonstrou funcionar em aplicações de WB e ELISA. Detecta MEK1 humano e de rato. Considere otimizar a diluição do anticorpo para suas amostras específicas e sistema de detecção.
• Ao avaliar a dinâmica de fosforilação do MEK1, experimentos de curso de tempo e inibidores de via (por exemplo, inibidores de MEK) podem ajudar a confirmar a especificidade.

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