Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-MEK1/MEK2-S217/S221 para WB, IP, ELISA - Q02750/P36507

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MEK1/MEK2

• As proteína quinases de dupla especificidade MEK1 (MAP2K1) e MEK2 (MAP2K2) são componentes essenciais da cascata de sinalização MAPK/ERK, transmitindo sinais de RAS-RAF ativado para ERK1/2.
• Após ativação, MEK1/2 catalisam a fosforilação concomitante de um resíduo de treonina e tirosina no motivo Thr-Glu-Tyr de ERK1 (MAPK3) e ERK2 (MAPK1), levando à sua ativação.
• MEK1/2 são ativados por quinases RAF (por exemplo, RAF1) a jusante da estimulação de recetores de fatores de crescimento, citocinas e hormonas, ligando sinais extracelulares a respostas intracelulares.
• MEK1 também promove a ativação de BRAF ao ligar-se a proteínas de andaime KSR1 ou KSR2, libertando uma interação inibitória e facilitando a dimerização de BRAF. Referências relacionadas: PMID:29433126
• A via MAPK/ERK regula diversos processos biológicos, incluindo crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação, bem como transcrição, metabolismo e rearranjos do citoesqueleto.
• MEK1 localiza-se no citoplasma, citoesqueleto (centrossoma, polo do fuso), núcleo e membrana; MEK2 mostra distribuição semelhante.
• MEK1 é amplamente expresso, com níveis extremamente baixos no cérebro. MEK2 tem um padrão de expressão amplo semelhante.
• MEK1/2 são fosfoproteínas e serina/treonina/tirosina quinases; a fosforilação de MEK1 em Ser217 e Ser221 é um evento-chave de ativação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um fosfopeptídeo sintético direcionado à Ser217 e Ser221 fosforiladas; espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma ativa duplamente fosforilada de MEK1/2.
• Para western blotting, MEK1/2 aparecem como bandas em torno de 40–44 kDa. Utilize controlos positivos apropriados (por exemplo, lisados celulares estimulados com EGF) e inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra.
• Para imunoprecipitação, um anticorpo monoclonal de coelho oferece alta especificidade e compatibilidade com protocolos padrão de IP. Valide a eficiência do pull-down com leituras de fosfo-ERK1/2.
• Este anticorpo é adequado para ELISA; considere revestir com o fosfopeptídeo ou usar um formato sanduíche para detetar MEK1/2 fosforilado em lisados celulares.

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