Anticorpo monoclonal de coelho Fosfo-MLKL-S345 para WB, IP, ELISA - Q9D2Y4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína de Domínio de Quinase de Linhagem Mista

• A proteína de domínio de quinase de linhagem mista (MLKL) é uma pseudoquinase crítica para a morte celular necroptótica. Pode existir uma isoforma de splicing alternativo.
• A MLKL é o efetor terminal da necroptose induzida por TNF. Após fosforilação pela RIPK3, forma homotrímeros, transloca-se para a membrana plasmática e desencadeia influxo de cálcio e rutura da membrana plasmática, executando necrose programada. Referências relacionadas: PMID:23835476, PMID:24012422, PMID:24019532
• Apesar do seu domínio semelhante a quinase, a MLKL carece de atividade proteína quinase e funciona como uma pseudoquinase. Referências relacionadas: PMID:24012422
• Em resposta a infeção por ortomixovírus, a MLKL nuclear pode ser ativada por ZBP1 e RIPK3, levando à rutura do envelope nuclear e fuga de DNA imunogénico para o citosol. Referências relacionadas: PMID:32200799, PMID:32296175
• A MLKL é predominantemente citoplasmática, mas pode associar-se à membrana celular e ao núcleo dependendo do estado de ativação.
• A MLKL é altamente expressa no timo, cólon, intestino, fígado, baço e pulmão, com níveis mais baixos no músculo esquelético, coração e rim, e está ausente no cérebro.
• A MLKL contém um domínio de hélice-coiled-coil e um local de ligação de ATP, embora não exiba atividade quinase. É uma fosfoproteína regulada por múltiplos eventos de fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um fosfo-péptido sintético correspondente à S441 do MLKL de rato; confirme a especificidade do anticorpo tratando amostras com fosfatase lambda ou usando competição com péptido não fosforilado.
• Para Western blot, é esperada uma banda próxima de 54 kDa. Utilize controlos positivos apropriados, como lisados de células de rato tratadas com estímulo necroptótico (por ex., TNF+ZVAD+mimético de SMAC).
• Na imunoprecipitação, é recomendada a pré-limpeza e otimização das proporções anticorpo:lisado para reduzir o fundo.
• O desempenho no ELISA pode depender das condições de revestimento; teste os formatos ELISA direto e sanduíche.

CamelBio: A Sua Ponte de Abastecimento Tudo-em-Um

A CamelBio fornece a fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa soluções abrangentes de matérias-primas para investigação em necroptose e morte celular. Oferecemos pares de anticorpos validados, proteínas recombinantes e reagentes auxiliares para apoiar o desenvolvimento de ensaios. Para alvos de alta procura como a MLKL, a nossa rede de fornecimento garante disponibilidade em volume e qualidade consistente, reduzindo o seu cronograma de desenvolvimento.