Phospho-MLKL-S358 Rabbit pAb - Q8NB16

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MLKL

• A MLKL (proteína semelhante ao domínio da quinase de linhagem mista) é uma pseudocinase que carece de atividade cinética intrínseca e serve como um executor crítico na via da necroptose. Referências relacionadas: PMID:22265413 PMID:22265414 PMID:22421439
• Após a fosforilação pela RIPK3 em S358, a MLKL homotrimeriza, transloca-se para a membrana plasmática e desencadeia a morte celular necrótica através do influxo de cálcio e ruptura da membrana. Referências relacionadas: PMID:22265413 PMID:22265414 PMID:22421439
• Em resposta à infeção por ortomixovírus, a RIPK3 nuclear fosforila a MLKL, levando à ruptura do invólucro nuclear e fuga de DNA celular para o citosol (por similaridade).
• A MLKL liga-se ao inositol hexaquisfosfato (InsP6), o que é essencial para a sua função necroptótica. Referências relacionadas: PMID:29883610
• A localização subcelular inclui o citoplasma, a membrana celular e o núcleo, consistente com a translocação dinâmica durante a necroptose.
• A MLKL é uma fosfoproteína; o splicing alternativo, domínios de hélice superenrolada (coiled-coil) e de ligação de nucleótidos são notados.
• O peso molecular previsto da MLKL humana é de aproximadamente 54 kDa (UniProt: 54479 Da).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, use inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar o epítopo fosforilado S358.
• Inclua um controlo não fosforilado ou tratamento com fosfatase para confirmar a especificidade fosfo-específica.
• O anticorpo reage cruzadamente com a MLKL de rato; valide no tecido apropriado ou sistema celular se usar amostras de rato.
• Em ELISA, o imunogénio peptídico fosforilado sintético pode servir como controlo positivo para o desenvolvimento do ensaio.
• É esperada uma banda de aproximadamente 54 kDa para a MLKL humana em Western blot.

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