pAb de coelho Phospho-Na+/K+-ATPase-S16 para WB - P05023

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ATP1A1 (subunidade alfa-1 da Na+/K+-ATPase)

• Catalisa o transporte ativo de Na+ para fora da célula e de K+ para dentro, estabelecendo gradientes eletroquímicos essenciais para o potencial de membrana, absorção de nutrientes e controle do volume celular. Referências relacionadas: PMID:29499166, PMID:30388404, PMID:35803952
• Sofre transições conformacionais E1/E2 alimentadas pela hidrólise de ATP, alternando a ligação e liberação de íons para expelir 3 Na+ e trazer 2 K+ por ciclo. Referências relacionadas: PMID:35803952
• Membro da família das ATPases do tipo P com dez domínios transmembranares e sítios de ligação a ATP e fosforilação intracelulares; a subunidade alfa-1 é a isoforma mais ubíqua.
• Localizada principalmente na membrana basolateral de epitélios, no sarcolema muscular, em projeções axonais e em melanossomos, alinhando-se aos seus papéis no transporte transepitelial e excitabilidade celular.
• A fosforilação em Ser16 (detectada por este anticorpo) é uma modificação regulatória; a proteína também é acetilada e sofre splicing alternativo que afeta sua função.
• Mutações em ATP1A1 estão associadas à doença Charcot-Marie-Tooth tipo 2DD, hipomagnesemia, epilepsia e deficiência intelectual, destacando sua importância para o sistema nervoso.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Desenvolvido contra um peptídeo fosforilado ao redor de Ser16, este anticorpo deve reconhecer a proteína endógena apenas quando fosforilada neste sítio. Valide a especificidade comparando os sinais de amostras tratadas e não tratadas com fosfatase.
• Para Western blot, prepare lisados com inibidores de fosfatase e considere usar um peptídeo bloqueador não fosforilado para confirmar a identidade da banda.
• Em ELISA, use o peptídeo fosforilado imunógeno e um análogo não fosforilado para avaliar a reatividade cruzada.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com humano, camundongo e rato; faça a titulação para cada espécie, pois os níveis de expressão podem variar.
• Como anticorpo policlonal, pode ocorrer variação entre lotes; revalide no seu ensaio ao receber um novo lote.

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