Phospho-NF-kB p65/RelA-S529 pAb de coelho para WB, ELISA - Q04206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fator de Transcrição p65

• NF-kB p65 (RELA) é uma subunidade do complexo do fator de transcrição NF-kappa-B, que forma homodímeros ou heterodímeros com outras proteínas Rel, como NFKB1/p50, RELB, REL e NFKB2/p52.
• O heterodímero RELA-NFKB1 é o complexo mais abundante, que se liga a sítios kappa-B no DNA para regular a transcrição de genes envolvidos na inflamação, imunidade, crescimento celular, apoptose e outros processos.
• RELA encontra-se predominantemente no citoplasma em estado inativo, ligado a inibidores I-kappa-B; após a estimulação, a fosforilação mediada por IKK e a degradação de I-kappa-B liberam RELA para translocação nuclear.
• RELA é essencial para a expressão de genes de citocinas em linfócitos T. Referências relacionadas: PMID:15790681
• RELA é um fator de transcrição chave que regula a resposta ao interferão durante a infecção por SARS-CoV-2. Referências relacionadas: PMID:33440148
• RELA sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, metilação, ubiquitinação e S-nitrosilação, que modulam a sua atividade; a fosforilação em Ser529 (o sítio do imunógeno) é um desses eventos regulatórios.
• A localização subcelular é principalmente nuclear após a ativação, mas RELA também trafega entre o núcleo e o citoplasma.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor da Ser529 da RELA humana, o que torna este anticorpo específico para a forma fosforilada. Utilize inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar os sinais de fosforilação.
• Para Western blotting, valide o anticorpo em linhagens celulares ou tecidos relevantes estimulados para induzir a ativação de NF-kB, e inclua controles apropriados (por exemplo, amostras não estimuladas ou tratadas com fosfatase) para confirmar a especificidade fosfo-específica.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com a RELA de humano, camundongo e rato, portanto pode ser utilizado nessas espécies; no entanto, verifique a especificidade no sistema de amostra alvo.
• Em aplicações de ELISA, recomenda-se a otimização das condições de revestimento e da faixa de detecção para obter resultados consistentes.

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