pAb de Coelho Anti-Fosfo-NF-kB p65/RelA-S536 - Q04206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA é uma subunidade do complexo fator de transcrição NF-kB, um regulador pleiotrópico presente em quase todos os tipos celulares que controla genes envolvidos na inflamação, imunidade, diferenciação, crescimento celular, tumorigênese e apoptose.
• A forma mais abundante de NF-kB é o heterodímero RELA-NFKB1, que se liga a sítios de DNA kappa-B com afinidade distinta; diferentes combinações de dímeros atuam como ativadores ou repressores transcricionais.
• Em células em repouso, o NF-kB é retido no citoplasma por inibidores IkB; após estimulação, a fosforilação e degradação de IkB liberam o NF-kB, permitindo a translocação nuclear e a ativação de genes-alvo.
• RELA sofre extensas modificações pós-traducionais — incluindo fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação — que modulam sua atividade transcricional, estabilidade e interações proteicas. A fosforilação em S536 dentro do domínio de transativação aumenta a produção transcricional.
• Essencial para a expressão de genes de citocinas em células T, fazendo a ponte entre as respostas imunes inata e adaptativa. Referências relacionadas: PMID:15790681
• Um fator de transcrição chave que regula a resposta ao interferon durante a infecção por SARS-CoV-2, ressaltando seu papel na imunidade inata antiviral. Referências relacionadas: PMID:33440148
• A localização subcelular alterna dinamicamente entre o núcleo e o citoplasma, governada por sinais de localização nuclear e interações com IkB.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Utilize inibidores de fosfatase nos tampões de lise e incubação para preservar o fosfo-epítopo S536 e evitar a perda de sinal.
• Sempre inclua um anticorpo total anti-NF-kB p65 como controle de carregamento e normalização em experimentos de western blot para confirmar alterações específicas de fosforilação.
• Para IHC-P, otimize a recuperação de antígeno e bloqueie peroxidases endógenas; considere o tratamento das seções com fosfatase para verificar a coloração fosfo-específica.
• Em aplicações de ELISA, determine as diluições ideais do anticorpo e as condições de detecção empiricamente para cada formato de ensaio.

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