pAb de coelho Phospho-NF-kB p65/RelA-T505 - Q04206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA é uma subunidade do complexo do fator de transcrição NF-kB, um regulador pleiotrópico ativado por diversos estímulos que controla genes envolvidos na inflamação, imunidade, crescimento celular, diferenciação, tumorigênese e apoptose.
• O complexo ativo de NF-kB pode ser um homodímero ou heterodímero de proteínas da família Rel; o heterodímero RELA-p50 é a forma mais abundante, que se liga a sítios k-B no DNA alvo e atua como ativador transcricional.
• Outros membros da família Rel incluem RELB, NFKB1 (p105/p50), NFKB2 (p52) e c-REL, com combinações distintas de dímeros que proporcionam especificidade e diversidade funcional.
• Em células em repouso, o NF-kB é retido no citoplasma por meio da interação com proteínas inibidoras I-kB; após o estímulo, a fosforilação e degradação de I-kB libera o NF-kB para translocação nuclear.
• RELA é essencial para a expressão de genes de citocinas em linfócitos T, uma função fundamental na imunidade adaptativa. Referências relacionadas: PMID:15790681
• Durante a infecção por SARS-CoV-2, a RELA atua como um fator de transcrição crítico que regula a resposta interferonica. Referências relacionadas: PMID:33440148
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação, acetilação, metilação, ubiquitinação) que modulam sua atividade, estabilidade e interações.
• A localização subcelular cicla entre o núcleo e o citoplasma, com a fosforilação em vários sítios (incluindo Thr505) influenciando a atividade transcricional ou a dinâmica do complexo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que cobre Thr505, portanto a reatividade do anticorpo é dependente da fosforilação. Garanta que as amostras sejam preparadas com inibidores de fosfatases para preservar o epítopo fosforilado.
• Para western blot, utilize protocolos padrão de SDS-PAGE e transferência; o tamanho esperado da banda para RELA fosforilada é de ~60 kDa. Otimize as condições de bloqueio e diluição do anticorpo empiricamente.
• No ELISA, pode ser utilizado o revestimento da placa com peptídeo fosforilado ou lisado de proteínas; a reatividade cruzada com formas não fosforiladas deve ser avaliada no sistema experimental.
• Este anticorpo é reativo com amostras humanas; para outras espécies, a homologia de sequência ao redor de Thr505 deve ser verificada antes do uso.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integrada

A CamelBio oferece a fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa acesso completo a matérias-primas para IVD, incluindo anticorpos validados, antígenos e reagentes auxiliares adaptados para aplicações de sinalização de NF-kB e resposta imunológica. De anticorpos monoclonais/policlonais ao fornecimento de reagentes a granel, apoiamos o desenvolvimento dos seus ensaios com fornecimento confiável e orientação técnica. Entre em contato para aproveitar nossa cadeia de suprimentos integrada para o seu próximo projeto, seja você precise de produtos padrão ou soluções de materiais personalizadas.