Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-NF-κB2-S866 para WB, ELISA - Q00653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de NF-κB2 (p100/p52)

• NF-κB2 codifica a subunidade p100, que é processada proteoliticamente para gerar a subunidade p52 de ligação ao DNA. p100 é a forma majoritária, enquanto p52 é a forma minoritária, produzida por meio da ativação não canônica de NF-κB.
• O complexo NF-κB é um fator de transcrição homo ou heterodimérico que regula a inflamação, imunidade, crescimento celular e apoptose. p52 forma heterodímeros com RelB para ativar a transcrição ou homodímeros para reprimi-la.
• Na via não canônica, a fosforilação de p100 em S866 (e outros resíduos) desencadeia o processamento dependente de ubiquitina para p52, permitindo a translocação nuclear e a ativação de genes alvo.
• NF-κB2 localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo; p100 retém principalmente as proteínas NF-κB associadas no citoplasma, enquanto os dímeros de p52 se deslocam para o núcleo após o estímulo.
• p52 se liga à sequência consenso de DNA κB 5'-GGRNNYYCC-3' em potenciadores de genes de resposta imune e de fase aguda.
• Em conjunto com RELB, NF-κB2 regula o relógio circadiano reprimindo a atividade ativadora da transcrição do heterodímero CLOCK-BMAL1.
• A proteína é uma fosfoproteína com múltiplas modificações; mutações em NFKB2 estão associadas à imunodeficiência variável comum (CVID10).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi desenvolvido contra um fosfopeptídeo sintético correspondente a S866 do p100 humano e, portanto, reconhece NF-κB2 apenas quando fosforilado neste resíduo.
• Para western blotting, verifique a detecção de uma banda de ~97 kDa (p100) e possivelmente uma banda de ~52 kDa (p52) em lisados de células estimuladas para ativar a via não canônica de NF-κB (por exemplo, com linfotoxina β ou anticorpos anti-LTβR).
• Como o anticorpo tem reatividade cruzada com NF-κB2 de camundongo, ele pode ser adequado para estudos em modelos murinos; no entanto, valide no tecido ou tipo celular relevante.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção com controles apropriados para garantir a fosfo-especificidade.

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