Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-NFKB1-S907 para Western Blot - P19838

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NFKB1

• NFKB1 codifica a proteína precursora p105, que é processada proteoliticamente para produzir a subunidade ativa p50 do complexo fator de transcrição NF-kappa-B. Referências relacionadas: PMID:1423592
• A subunidade p50, juntamente com RELA/p65, forma o complexo heterodimérico p65-p50, um ativador transcricional que se liga à sequência consenso kappa-B em promotores de genes alvo, regulando respostas imunes e inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:1740106 PMID:7830764
• NFKB1/p105 também funciona como um inibidor citoplasmático, retendo dímeros de NF-kappa-B em um estado inativo até que sinais de ativação desencadeiem sua degradação via via da quinase I-kappa-B.
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação na Ser907, que influencia seu processamento e atividade transcricional.
• Em células em repouso, NFKB1/p105 é predominantemente citoplasmático, mas, após estímulo, os complexos contendo p50 translocam para o núcleo para regular a expressão gênica.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; o precursor de comprimento total p105 tem um peso molecular de aproximadamente 105 kDa, enquanto a subunidade madura p50 tem cerca de 50 kDa.
• A sinalização do NF-kappa-B é central para a sobrevivência, proliferação, diferenciação e apoptose celular, ligando o NFKB1 ao câncer, doenças inflamatórias crônicas e distúrbios imunológicos.
• NFKB1/p105 também interage com MAP3K8 para reprimir a sinalização MAPK, destacando seu papel na comunicação cruzada entre vias inflamatórias.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para detecção por Western blot do fosfo-NFKB1 (Ser907), inclua inibidores de fosfatase durante a lise celular e preparação da amostra para garantir que a fosforilação seja preservada.
• Use linhagens de células imunes ou inflamatórias estimuladas (por exemplo, células HeLa ou Jurkat tratadas com TNF-alfa) como controles positivos para confirmar a especificidade do anticorpo.
• Otimize a diluição do anticorpo primário (por exemplo, 1:500-1:2000) e as condições de incubação com base na intensidade do sinal e nos níveis de fundo em seu sistema.
• Combine com um anticorpo pan-NFKB1 para verificar os níveis totais de proteína e confirmar alterações específicas de fosforilação.
• Se for usar para imuno-histoquímica ou outras aplicações, valide o anticorpo no sistema de amostra relevante, pois o reagente foi testado apenas para Western blot.

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