Phospho-NFKB1-S927 Rabbit pAb para WB, ELISA - P19838

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NFKB1

• O NFKB1 codifica o precursor p105, que é processado na subunidade ativa p50 do NF-kappa-B. O p105 atua como um fator de retenção citoplasmática para proteínas NF-kappa-B anexadas. Referências relacionadas: PMID:1423592
• A subunidade ativa p50 associa-se ao RELA/p65 para formar o complexo NF-kappa-B p65-p50, um fator de transcrição que se liga a locais kappa-B no DNA. Referências relacionadas: PMID:1740106 PMID:7830764
• O NF-kappa-B é um fator de transcrição pleiotrópico envolvido na inflamação, imunidade, crescimento celular e apoptose, existindo como vários dímeros com atividades transcricionais distintas.
• O homodímero p50-p50 atua como um repressor transcricional, mas pode tornar-se um ativador quando associado ao BCL3.
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática; após a ativação, os complexos NF-kappa-B translocam para o núcleo.
• Modificações pós-traducionais principais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação, regulando sua atividade.
• A fosforilação da serina 927 pode modular a função do NFKB1; o anticorpo é específico para esta modificação.
• Família de genes: O NFKB1 é um membro da família NF-kappa-B, que inclui RELA, RELB, REL e NFKB2.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente à serina 927 do NFKB1 humano. Para Western blot, considere o uso de inibidores de fosfatase apropriados durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação.
• O anticorpo é gerado em coelho e espera-se que seja específico para a forma fosforilada; também pode reconhecer a forma não fosforilada se presente em abundância. Valide em lisatos de controle positivos e negativos relevantes.
• Para ELISA, o peptídeo pode ser usado como antígeno de revestimento ou competidor para confirmar a especificidade.
• Como o peso da proteína é de 105 kDa, certifique-se de usar uma porcentagem adequada de gel para separação (por exemplo, SDS-PAGE a 8–10%) e marcadores de peso molecular apropriados.
• A reatividade cruzada é relatada para humanos; se usar em outras espécies, recomenda-se o alinhamento de sequência ao redor de S927.

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