Fosfo-p38 MAPK-T180 pAb de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK

• O MAPK14 codifica a proteína cinase ativada por mitógeno p38 alfa, uma serina/treonina cinase essencial para as respostas celulares ao estresse, citocinas pró-inflamatórias e mitógenos.
• É um dos quatro membros da família p38 MAPK (alfa, beta, gama, delta) e é conhecido por múltiplos apelidos, incluindo CSBP, SAPK2A e MXI2.
• Após a ativação via dupla fosforilação em Thr-180 e Tyr-182, a p38 alfa fosforila uma ampla gama de substratos, incluindo as cinases a jusante MAPKAPK2/MK2, RPS6KA5/MSK1 e MKNK1/MNK1, regulando assim a expressão gênica, a estabilidade do mRNA e a síntese proteica. Referências relacionadas: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• No núcleo, a p38 MAPK ativada fosforila direta ou indiretamente fatores de transcrição como ATF1, ATF2, ELK1, p53/TP53 e MEF2C, modulando a expressão gênica imediata e programas transcricionais induzidos por estresse. Referências relacionadas: PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• A p38 MAPK também desempenha um papel citoplasmático na regulação da renovação proteica, endocitose e autofagia; por exemplo, fosforila SIAH2 e modula o tráfego de ATG9. Referências relacionadas: PMID:17003045, PMID:19893488
• O splicing alternativo gera as isoformas MXI2 (ativada por mitógenos/estresse oxidativo; atividade de cinase fraca em relação a ELK1 e ATF2) e EXIP (pró-apoptótica).
• O fracionamento subcelular revela a p38 MAPK tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus duplos papéis de sinalização e transcricionais.
• A p38 MAPK é expressa na maioria dos tecidos, com os níveis mais altos no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno de Thr-180 de MAPK14 humana, espera-se que este anticorpo reconheça especificamente a forma fosforilada e ativa da p38 MAPK. Para uma detecção ideal, certifique-se de que as amostras sejam preparadas em condições que preservem a fosforilação proteica (por exemplo, use inibidores de fosfatases e evite incubações prolongadas em temperatura ambiente).
• Para Western blot (WB), considere usar um método de enriquecimento de proteínas de baixa abundância se a fosforilação endógena da p38 for fraca; o peso molecular previsto é de aproximadamente 41 kDa.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antígenio e a diluição do anticorpo devem ser determinadas empiricamente; um sinal específico para fosfo pode ser validado pré-tratando as seções de tecido com fosfatase lambda.
• Para aplicações de ELISA, use, se possível, um padrão de p38 fosforilada recombinante e confirme a linearidade e a especificidade usando controles de peptídeo não fosforilado.
• A reatividade cruzada foi observada com humano, camundongo e rato, mas a validação em seu sistema experimental específico é recomendada.

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