Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-p38 MAPK-T180/Y182 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q15759/P53778/O15264/Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de p38 MAPK

• MAPK11 é uma serina/treonina quinase e membro da família das quinases ativadas por mitógenos p38, também conhecida como SAPK2b ou p38-2.
• Como parte da via de transdução de sinal das MAP quinases, ela responde a estímulos extracelulares como citocinas pró-inflamatórias e estresse físico, levando à ativação direta de fatores de transcrição. Referências relacionadas: PMID:12452429, PMID:20626350, PMID:35857590
• As p38 MAPKs fosforilam uma ampla gama de alvos downstream, incluindo as quinases MSK1/2, MK2/3 e MNK1/2, que por sua vez regulam a transcrição, estabilidade do mRNA e a tradução. Referências relacionadas: PMID:9687510, PMID:11154262
• No núcleo, as p38 MAPKs fosforilam fatores de transcrição como ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, PTPRH, DDIT3, p53, MEF2C e MEF2A para modular a expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:10330143, PMID:15356147, PMID:9430721
• A quinase também regula a remodelação da cromatina ao induzir a fosforilação da histona H3 no 'Ser-10', aumentando o recrutamento de NF-kappa-B aos promotores de genes inflamatórios.
• Subcelularmente, MAPK11 se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo.
• A expressão tecidual é mais alta no cérebro e no coração, com presença adicional na placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas.
• As principais modificações pós-traducionais incluem fosforilação em T180 e Y182 (crítica para a ativação), e a proteína é classificada nas palavras-chave de resposta ao estresse e regulação da transcrição.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético, o anticorpo reconhece especificamente a forma ativada duplamente fosforilada de p38 MAPK. Verifique a especificidade comparando lisados de células tratadas versus não tratadas (por exemplo, com e sem indutores de estresse).
• Para Western blotting, considere usar um gel SDS-PAGE a 10% e carregar 20–30 μg de lisado proteico. Múltiplas bandas podem ser observadas devido à detecção de diferentes isoformas de p38 (pesos previstos: 29, 34, 35 e 41 kDa). Inclua marcadores de peso molecular adequados e um controle de carregamento.
• Em aplicações de imunoprecipitação ou ELISA, confirme a ligação fosfo-específica em condições não desnaturantes para garantir a acessibilidade do epítopo.
• Para imunofluorescência (IF-P), use um método de fixação que preserve o estado de fosforilação (por exemplo, 4% paraformaldeído) e realize a permeabilização com 0,1% de Triton X-100.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), pode ser necessário recuperação de antígeno com tampão de citrato (pH 6,0). Faça a titulação do anticorpo para encontrar a diluição ideal.
• Sempre inclua um controle negativo pré-adsorvendo o anticorpo com o peptídeo fosforilado, ou usando tratamento com fosfatase alcalina para confirmar a especificidade por fosforilação.

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