Anticorpo policlonal de coelho Phospho-p38 MAPK (T180/Y182) para WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de p38 MAPK (MAPK14)

• A proteína quinase ativada por mitógeno 14 (MAPK14), também conhecida como p38 alfa, é uma serina/treonina quinase codificada pelo gene MAPK14. O splicing alternativo dá origem a isoformas incluindo MXI2 e EXIP, que apresentam preferências de substrato distintas e papéis diferentes na sinalização mitogênica e apoptótica.
• MAPK14 está localizada principalmente tanto no citoplasma quanto no núcleo, permitindo que ela transduza sinais extracelulares para fatores de transcrição nuclear e module processos citoplasmáticos como renovação proteica e endocitose.
• Após dupla fosforilação em Thr180 e Tyr182, MAPK14 ativa efetores downstream como RPS6KA5/MSK1 e RPS6KA4/MSK2. Estas quinases fosforilam fatores de transcrição (CREB1, ATF1, RELA/NFKB3) e componentes da cromatina como a histona H3 em Ser10, facilitando a indução de genes imediatos precoces (PubMed:9687510, PubMed:9792677). Referências relacionadas: PMID:9687510, PMID:9792677
• Além do controle transcricional, p38 MAPK regula a expressão gênica pós-transcricionalmente. Ela ativa MAPKAPK2/MK2 e MAPKAPK3/MK3 para fosforilar proteínas de ligação ao mRNA (por exemplo, ZFP36, ELAVL1) e modula a tradução por meio da fosforilação de EIF4E2 mediada por MNK1/MNK2 (PubMed:11154262). Referências relacionadas: PMID:11154262
• MAPK14 influencia a degradação proteica e o tráfego de receptores de membrana. Ela fosforila a ubiquitina ligase SIAH2 (PubMed:17003045), controla a endocitose do EGFR por meio de efetores de RAB5A (PubMed:16932740) e promove a remoção do ectodomínio de ligantes ao ativar a metaloprotease ADAM17 (PubMed:20188673). Referências relacionadas: PMID:17003045, PMID:16932740, PMID:20188673
• A quinase é fundamental para a eritropoiese induzida por estresse e o desenvolvimento placentário, como evidenciado pelo seu papel na expressão do gene EPO e no crescimento de vasos sanguíneos fetais (PubMed:10943842). Ela também participa da apoptose e da piroptose; a isoforma EXIP pode promover a apoptose, enquanto a MAPK14 de comprimento total fosforila NLRP1 para disparar a ativação do inflamassoma (PubMed:35857590). Referências relacionadas: PMID:10943842, PMID:35857590
• Durante a infecção por Mycobacterium tuberculosis, MAPK14 é alvo do efetor bacteriano EsxA, levando à inibição dependente de fosforilação da produção de IFN-gamma em células T (PubMed:21586573). Referências relacionadas: PMID:21586573

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi um peptídeo fosforilado sintético que compreende Thr180 e Tyr182 da p38 MAPK humana. Para western blot (WB) e imunohistoquímica (IHC-P), considere usar amostras frescas ou devidamente preservadas com inibidores de fosfatase para manter os sinais de fosforilação.
• Para aplicações de ELISA, a inclusão de um controle de peptídeo não fosforilado ou o tratamento com lambda fosfatase pode ajudar a verificar a fosfo-especificidade.
• O peso molecular previsto é de 41 kDa. Em lisados de células induzidas (por exemplo, células HeLa, HEK293T tratadas com anisomicina ou UV), uma banda desse tamanho deve aparecer; confirme por detecção paralela com um anticorpo pan-p38.
• A reatividade cruzada é reportada para humano, camundongo e rato. Valide no seu tipo de amostra e espécie específicos para confirmar a reatividade e a diluição ideal.
• Este anticorpo não foi testado em outras aplicações como imunoprecipitação (IP) ou imunofluorescência (IF); experimentos piloto são recomendados se outros usos forem desejados.

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