mAb de Coelho Anti-Fosfo-p53-S33 para WB, ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p53

• Codificado pelo gene TP53, o antígeno tumoral celular p53 é uma fosfoproteína que existe como múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo e ao uso de promotores.
• Funciona como um fator de transcrição multifuncional que induz a interrupção do ciclo celular, reparo de DNA ou apoptose após dano ao DNA. Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Atua como um supressor tumoral crucial ao regular negativamente a divisão celular através do controle da expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Promove a apoptose através da estimulação da expressão do antígeno BAX e FAS ou repressão de Bcl-2, com atividade modulada pela interação com proteínas ASPP. Referências relacionadas: PMID:12524540, PMID:17189187
• Localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo núcleo, citoplasma, mitocôndrias, centrossomo e retículo endoplasmático, consistente com seus diversos papéis regulatórios.
• Sujeita a extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação em serinas como S33, acetilação, metilação e ubiquitinação, que governam a estabilidade e a atividade transcricional.
• Expressa ubiquamente com distribuição de isoformas dependente do tecido; certas isoformas podem exibir efeitos dominantes-negativos nas funções canônicas da p53.
• Regula o relógio circadiano ao reprimir a ativação transcricional de PER2 mediada por CLOCK-BMAL1. Referências relacionadas: PMID:24051492

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo tem como alvo a fosforilação na S33, adicione inibidores de fosfatase aos tampões de lise e manuseie as amostras no gelo para preservar o estado de fosforilação.
• Para Western blot, considere usar um regime de bloqueio específico para fosfo e confirme a especificidade comparando os sinais antes e depois do tratamento com fosfatase ou competição de peptídeos.
• Em ELISA, capture ou detecte a fosfo-p53 em lisados celulares; inclua controles não fosforilados e não tratados para validar a especificidade da fosforilação.
• A p53 pode estar em baixa abundância sob condições normais; o enriquecimento por imunoprecipitação ou tratamento com agentes que danificam o DNA pode melhorar a detecção.

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