Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-p53-S46 para WB, IP, ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p53

• A proteína p53, codificada pelo gene TP53, é um fator de transcrição multifuncional e um supressor tumoral crítico que mantém a estabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724
• Após ativação, a p53 induz a parada do ciclo celular, principalmente via upregulação transcricional do inibidor de quinase dependente de ciclina p21, para permitir o reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724
• A p53 promove a apoptose através da ativação transcricional de genes pró-apoptóticos como BAX e FAS, e repressão do Bcl-2 anti-apoptótico, com regulação por membros da família ASPP. Referências relacionadas: PMID:12524540 PMID:17189187
• Além da apoptose, a p53 está envolvida na necrose induzida por estresse oxidativo, regulação do relógio circadiano e silenciamento gênico mediado por RNA não codificante. Referências relacionadas: PMID:24051492
• A p53 é uma fosfoproteína regulada por extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, ubiquitinação e metilação, que modulam sua estabilidade e atividade transcricional.
• Subcelularmente, a p53 localiza-se dinamicamente no núcleo, citoplasma, mitocôndrias, retículo endoplasmático e centrossomo, refletindo seus diversos papéis.
• A proteína é expressa ubiquamente, com múltiplos isoformas dependentes do tecido detectadas em tecidos normais.
• Palavras-chave: supressor tumoral, transcrição, apoptose, ciclo celular, fosfoproteína, resposta a danos no DNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos em torno da Ser46 da p53 humana; a especificidade do anticorpo para a forma fosforilada deve ser confirmada usando amostras tratadas com fosfatase ou peptídeos de bloqueio de fosforilação.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em ~44 kDa. A diluição ótima do anticorpo primário deve ser determinada empiricamente; considere começar com 1:500-1:2000.
• Para imunoprecipitação (IP), o anticorpo pode capturar a p53 fosforilada; inclua inibidores de fosfatase em tampões de lise para preservar os sinais de fosforilação.
• Para ELISA, use o anticorpo em um formato direto ou sanduíche como reagente de captura ou detecção; emparelhe com padrões apropriados.
• A reatividade cruzada com espécies não humanas não foi avaliada; valide no sistema de amostra relevante se usar outras espécies.

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