Anticorpo policlonal de coelho Phospho-p53-T18 para WB e ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p53

• A p53, codificada pelo gene TP53, é um antígeno tumoral celular e um supressor tumoral crítico que atua como fator de transcrição multifuncional.
  Referências relacionadas:
  PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724

• Ao se ligar à sequência de DNA alvo, a p53 induz a parada do ciclo celular, o reparo do DNA ou a apoptose, regulando negativamente a divisão celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724

• A indução da apoptose é mediada pela estimulação da expressão de BAX e FAS ou pela repressão de Bcl-2, sendo modulada por interações com ASPP1/ASPP2 (ativação) e iASPP (inibição).
  Referências relacionadas:
  PMID:12524540, PMID:17189187

• A p53 realiza tráfego entre o citoplasma e o núcleo, e se localiza nos corpos PML, retículo endoplasmático, mitocôndrias e centrossomos, o que reflete suas diversas funções biológicas.

• É expressa de forma ubíqua, com múltiplas isoformas que apresentam padrões de distribuição dependentes do tecido.

• Como fosfoproteína, a p53 passa por extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam sua estabilidade e atividade; a fosforilação na posição Thr18 é um evento chave para sua ativação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para análise por Western blot, recomenda-se o uso de tampões de lise contendo inibidores de fosfatases para preservar o sinal de fosforilação na posição Thr18.
• Valide a especificidade do anticorpo comparando os sinais de amostras tratadas com fosfatase ou por bloqueio competitivo com o peptídeo não fosforilado.
• Como o anticorpo é produzido em coelho, utilize um anticorpo secundário anti-coelho apropriado para a detecção.
• Ao realizar o ELISA, certifique-se de fazer a cobertura da placa com o peptídeo fosforilado ou antígeno e otimize a diluição do anticorpo.
• Confirme a reatividade cruzada em outras espécies, se necessário, já que a validação atual foi realizada para amostras humanas.

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