Fosfo-p70 S6 Quinase 1-T389 Coelho pAb - P23443

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Ribossomal S6 Quinase beta-1

• RPS6KB1 codifica a proteína ribossomal S6 quinase beta-1 de 70 kDa (p70S6K), também conhecida como S6K1, p70 S6 quinase alfa, ou serina/treonina-proteína quinase 14A (STK14A).
• A quinase atua como um efetor chave a jusante do mTORC1, regulando a síntese proteica e o crescimento celular. Após estimulação mitogênica, a fosforilação mediada por mTORC1 dissocia a p70S6K do complexo EIF3, permitindo que ela fosforile fatores de tradução como EIF4B e PDCD4, promovendo assim a iniciação da tradução dependente de cap. Referências relacionadas: PMID:16286006 PMID:17053147
• A p70S6K1 contribui para a sobrevivência celular ao inativar a proteína pró-apoptótica BAD através da fosforilação. Além disso, ela fosforila a URI1 mitocondrial, perturbando o complexo URI1-PPP1CC; a PPP1CC liberada desfosforila a p70S6K1 na Thr-412, criando um ciclo de feedback negativo para sinalização anti-apoptótica. Referências relacionadas: PMID:17936702
• A quinase exerce feedback negativo na sinalização mTORC2/AKT1 ao fosforilar componentes do mTORC2 (SIN1, MTOR, RICTOR), e também controla a atividade do mTORC1 ao fosforilar a DEPTOR. Referências relacionadas: PMID:15899889 PMID:19720745 PMID:19935711 PMID:22017876
• A p70S6K1 media a resistência à insulina induzida por TNF ao fosforilar a IRS1 em múltiplos resíduos de serina, direcionando-a para degradação. Referências relacionadas: PMID:18952604
• Ela fosforila e ativa a CAD, a enzima limitante da taxa na síntese de novo de pirimidina, acoplando assim a sinalização do mTOR ao metabolismo de nucleotídeos. Referências relacionadas: PMID:23429703
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo citoplasma, núcleo, membrana externa mitocondrial e sinapse/sinaptossomo. É amplamente expressa e sujeita a splicing alternativo e várias modificações pós-traducionais (ex.: fosforilação, acetilação).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espera-se uma banda correspondente à proteína alvo em aproximadamente 59 kDa. Inclua inibidores de fosfatase em tampões de lise para preservar o estado de fosforilação.
• Para confirmar a especificidade para fosfo, considere realizar um ensaio de desfosforilação usando fosfatase lambda ou competindo com o peptídeo não fosforilado.
• Para IHC-P, otimize as condições de recuperação de antígeno e a titulação do anticorpo; a inclusão de controles positivo e negativo apropriados é recomendada.
• No ELISA, revestir a placa com o peptídeo imunógeno fosforilado e validar a linearidade do sinal em uma série de diluições.

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