pAb de coelho para Phospho-p70 S6 Kinase 1-T421/S424 para WB, ELISA - P23443

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína quinase S6 ribossômica beta-1

• Serina/treonina-proteína quinase que atua a jusante da sinalização de mTOR em resposta a fatores de crescimento e nutrientes para promover a proliferação celular, o crescimento celular e a progressão do ciclo celular; regula a síntese proteica por meio da fosforilação de EIF4B, RPS6 e EEF2K, e contribui para a sobrevivência celular reprimindo a função pró-apoptótica de BAD. Referências relacionadas: PMID:11500364, PMID:12801526, PMID:14673156
• Em condições de depleção de nutrientes, a forma inativa se associa ao complexo de iniciação da tradução EIF3; após estimulação mitogênica, a fosforilação por mTORC1 leva à dissociação do complexo EIF3 e à ativação. Também controla o início da tradução ao fosforilar um regulador negativo de EIF4A, PDCD4, direcionando-o para ubiquitinação e subsequentemente proteólise. Referências relacionadas: PMID:16286006, PMID:17053147
• Desempenha um papel na regulação por retroalimentação de mTORC2 por mTORC1 ao fosforilar MAPKAP1/SIN1, MTOR e RICTOR, resultando na inibição da sinalização de mTORC2 e AKT1; também está envolvido na regulação por retroalimentação de mTORC1 e mTORC2 ao fosforilar DEPTOR. Referências relacionadas: PMID:15899889, PMID:19720745, PMID:19935711, PMID:22017876
• Medea a resistência à insulina induzida por TNF ao fosforilar IRS1 em múltiplos resíduos de serina, resultando na degradação acelerada de IRS1. Referências relacionadas: PMID:18952604
• Fosforila e ativa a enzima de biossíntese de pirimidina CAD, a jusante de MTOR; fosforila EPRS e, portanto, desempenha um papel fundamental na captação de ácidos graxos por adipócitos e também muito provavelmente na inibição da tradução induzida por interferon-gama. Referências relacionadas: PMID:23429703, PMID:28178239
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo, membrana externa da mitocôndria e sinapse.
• É amplamente expresso em tecidos.
• Contém múltiplos sítios de fosforilação, acetilação e iniciação alternativa; pertence à família das quinases AGC.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Considere realizar o tratamento com fosfatase em lisados ou usar bloqueio com peptídeo não fosforilado para confirmar a fosfo-especificidade do anticorpo.
• Para Western blot, recomenda-se validar o anticorpo usando lisados de controle positivo de células estimuladas com fatores de crescimento ou sob condições ricas em nutrientes para induzir a fosforilação de p70 S6 Kinase 1 em T421/S424.
• O anticorpo é policlonal de coelho; realize experimentos de titulação para determinar a diluição de trabalho ideal para suas condições específicas de ensaio.
• Observou-se reatividade cruzada com amostras humanas, de camundongo e rato; valide no sistema modelo de espécie relevante antes de experimentos em larga escala.
• Para detecção baseada em ELISA, certifique-se de que o par de anticorpos de captura/detecção distingue as formas fosforiladas das não fosforiladas.

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