Anticorpo Policlonale de Coelho Phospho-PAK2-S20 para WB & ELISA - Q13177

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PAK2

• PAK2 é uma serina/treonina quinase que funciona como efetora downstream de CDC42 e RAC1, sofrendo autofosforilação após a ligação à GTPase para regular a dinâmica do citoesqueleto, a motilidade celular e a proliferação (PubMed:7744004, PubMed:12853446, PubMed:16617111, PubMed:19273597).
  Referências relacionadas:
  PMID:7744004 PMID:12853446 PMID:16617111 PMID:19273597
• O PAK2 de comprimento completo promove a sobrevivência celular, enquanto a clivagem pela caspase em danos ao DNA produz um fragmento pró-apoptótico p34 que se transloca para o núcleo e ativa a via JNK (PubMed:12853446, PubMed:16617111, PubMed:9171063).
  Referências relacionadas:
  PMID:12853446 PMID:16617111 PMID:9171063
• Sua atividade quinase fosforila vários substratos: histona H4 para montagem do nucleossomo, JUN para proliferação induzida por EGF, MAPK4/6 para regular a migração e CASP7 para prevenir a apoptose (PubMed:21724829, PubMed:21177766, PubMed:21317288, PubMed:21555521, PubMed:27889207).
  Referências relacionadas:
  PMID:21724829 PMID:21177766 PMID:21317288 PMID:21555521 PMID:27889207
• Funções independentes da atividade quinase envolvem a orientação do fuso mitótico através da associação com ARHGEF7 e GIT1 (PubMed:19273597, PubMed:19923322).
  Referências relacionadas:
  PMID:19273597 PMID:19923322
• É expressa de forma ubíqua, com níveis mais elevados no músculo esquelético, ovário, timo e baço.
• Apresenta distribuição subcelular dinâmica, localizando-se no citoplasma, núcleo, região perinuclear e membrana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, adicione inibidores de fosfatase ao buffer de lise para preservar a fosforilação. Verifique a especificidade tratando as amostras com lambda fosfatase.
• O imunógeno é um fosfopeptídeo ao redor da Ser20; a reatividade cruzada com o PAK2 não fosforilado pode ser mínima, mas deve ser validada.
• Adequado para detectar a ativação de PAK2 em linhas celulares tratadas com fatores de crescimento ou estímulos apoptóticos; considere incluir controles positivos e negativos.
• Foi relatado que o anticorpo funciona em ELISA; condições adequadas de cobertura e bloqueio devem ser otimizadas.
• A reatividade cruzada com PAK2 de camundongo e rato está indicada; o alinhamento de sequência mostra alta conservação ao redor do sítio de fosforilação, mas recomenda-se validação local.

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