Phospho-PDGFR alpha-Y1018 Rabbit pAb para WB, ELISA - P16234

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas

• O receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFRA, também conhecido como CD140a ou PDGFR-2) é um receptor de tirosina quinase de superfície celular pertencente à família PDGFR. Liga-se aos ligandos PDGFA, PDGFB e PDGFC, mediando sinais essenciais para a proliferação, sobrevivência, migração e diferenciação celular.
• O PDGFRA desempenha um papel crítico no desenvolvimento embrionário, incluindo a formação normal do esqueleto, o fechamento cefálico e o desenvolvimento da mucosa gastrointestinal e vilosidades intestinais. Também é necessário para o recrutamento de células mesenquimais.
• Na cicatrização de feridas e ativação plaquetária, a sinalização do PDGFRA promove a migração celular e quimiotaxia, e contribui para a agregação plaquetária induzida por trombina e secreção de agonistas de grânulos.
• O receptor localiza-se na membrana celular, bem como em projeções celulares como cílios e no aparelho de Golgi. A sua distribuição subcelular é regulada pela ligação e ativação do ligando.
• O PDGFRA sofre autofosforilação em múltiplos resíduos de tirosina, incluindo Y1018, o que cria locais de ancoragem para moléculas de sinalização a jusante como PLCG1, PIK3R1 e PTPN11, levando à ativação das vias MAPK/ERK, PI3K/AKT e STAT.
• A expressão específica do tecido é generalizada; detetada no cérebro, fibroblastos, músculo liso, coração e embriões, bem como em tumores colorretais primários e metastáticos. Também é encontrado em plaquetas ao nível proteico.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, glicosilação e ubiquitinação, que regulam a atividade, tráfego e degradação do recetor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde a um peptídeo fosforilado em redor da tirosina 1018 (Y1018) no domínio intracelular do PDGFRA humano. Este local é um local conhecido de autofosforilação crítico para a sinalização a jusante.
• O anticorpo é adequado para aplicações de Western Blot (WB) e ELISA, conforme indicado. Para WB, considere usar controlos positivos apropriados (por exemplo, lisados de células estimuladas onde o PDGFRA está fosforilado) e valide a especificidade da deteção de fosforilação comparando amostras tratadas vs não tratadas.
• Uma vez que o PDGFRA é um recetor transmembranar, os protocolos de extração de proteínas de membrana podem melhorar a deteção. O peso molecular previsto é de 123 kDa; considere usar percentagens de gel apropriadas e condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Para ELISA, a fosfo-especificidade deve ser confirmada usando peptídeos fosforilados vs não fosforilados ou através de experimentos de tratamento com fosfatase.
• Nota que a reatividade cruzada é reportada para humano; a reatividade com outras espécies deve ser validada experimentalmente se necessário.

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