Fosfo-PDHA1-S293 mAb de Coelho - P08559

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PDHA1

• A PDHA1 (subunidade alfa do componente E1 do piruvato desidrogenase, forma somática, mitocondrial), também conhecida como PDHE1-A tipo I, é codificada pelo gene PDHA1 em humanos. É uma enzima metabólica crucial que, junto com a PDHB, constitui a subunidade E1 heterotetramérica do complexo piruvato desidrogenase (PDH).
• O complexo PDH catalisa a conversão global de piruvato em acetil-CoA e CO2, ligando a glicólise citoplasmática ao ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:19081061 PMID:7782287
• Especificamente, a subunidade E1 catalisa a descarbonilação dependente de pirofosfato de tiamina (TPP) do piruvato e a acetilação redutiva de grupos lipoil ligados covalentemente ao componente E2. Referências relacionadas: PMID:17474719 PMID:19081061 PMID:7782287
• A PDHA1 pertence à família de genes do complexo piruvato desidrogenase; mutações neste gene estão associadas à doença mitocondrial primária e à síndrome de Leigh.
• Em nível subcelular, a PDHA1 localiza-se na matriz mitocondrial, consistente com o seu papel no metabolismo do piruvato.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação (por exemplo, em Ser293) e acetilação, que modulam a atividade enzimática. Palavras-chave: Acetilação, Fosfoproteína, Pirofosfato de tiamina, Magnésio, Ligação de metal.
• A proteína é expressa de forma onipresente nos tecidos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos circundantes à Ser293 da PDHA1 humana, visando um epítopo específico de fosforilação. Isso torna o anticorpo adequado para detectar PDHA1 endogenamente fosforilada sob condições apropriadas de estímulo.
• Para Western blotting, a PDHA1 tem um peso molecular previsto de 43 kDa; considere otimizar o bloqueio e a diluição do anticorpo primário usando lisados de células/tecidos humanos, de camundongo ou de rato.
• Para imunoprecipitação, o formato monoclonal de coelho pode oferecer alta especificidade; valide a eficiência de captura com controles positivos e negativos para fosfo.
• As aplicações de ELISA são validadas; otimize o antígeno de revestimento e as condições de detecção para análise quantitativa de fosfo.
• A reatividade cruzada relatada inclui camundongo e rato; verifique a homologia da sequência ao redor do local de fosforilação se estender para outras espécies.

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