Fosfo-PDK1/PDPK1-S241 pAb de Coelho - O15530

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PDK1 (proteína quinase 1 dependente de 3-fosfoinositídeo)

• PDPK1 (PDK1) codifica uma serina/treonina quinase expressa ubiquamente que serve como regulador mestre da família de quinases AGC, incluindo PKB/AKT, p70 S6K, p90 RSK e isoformas de PKC. Referências relacionadas: PMID:10226025 PMID:10480933 PMID:10995762

• Na sinalização de insulina, o PDK1 fosforila e ativa o AKT1 em Thr308, propagando sinais a jusante que controlam a captação de glicose, síntese de glicogênio e sobrevivência celular. Referências relacionadas: PMID:10226025 PMID:12167717 PMID:9094314

• O PDK1 localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular e adesões focais, permitindo sinalização diversificada a partir de múltiplos compartimentos celulares.

• A forma tirosina-fosforilada do PDK1 é essencial para a dinâmica das adesões focais e está regulada positivamente em tecidos doentes do pulmão, fígado, cólon e mama. Referências relacionadas: PMID:14585963

• O PDK1 modula vias adicionais: regula negativamente a sinalização TGF-beta fosforilando proteínas SMAD e ativa o NF-κB via fosforilação de IKKB, influenciando respostas inflamatórias e imunes. Referências relacionadas: PMID:17327236 PMID:16207722

• O PDK1 é crítico para a motilidade e quimiotaxia de células endoteliais vasculares, participando de processos angiogênicos. Referências relacionadas: PMID:17371830

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Anticorpos específicos para fosfo exigem manuseio cuidadoso da amostra: adicione inibidores de fosfatases aos tampões de lise e evite incubação prolongada da amostra em temperatura ambiente.
• Para Western blotting, trate uma parte da amostra com lambda fosfatase para confirmar a especificidade fosfo da banda em ~63 kDa.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), as condições de fixação e permeabilização podem afetar a acessibilidade do epítopo; teste múltiplos métodos de fixação (por exemplo, metanol vs. formaldeído) para sinal ideal.
>Dada a reatividade cruzada com camundongo e rato, valide o anticorpo no modelo de espécie pretendido pelo alinhamento de sequência do local de fosforilação e região do antígeno.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar do uso de um competidor de peptídeo fosfo para garantir a especificidade do sinal.

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