Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Phospho-PDK1/PDPK1-S241 para WB, IF/ICC, ELISA - O15530

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PDK1/PDPK1

• A PDK1 (PDPK1) é uma quinase mestre serina/treonina que fosforila e ativa um subgrupo de quinases da família AGC, incluindo AKT/PKB, quinase p70 S6, p90 RSK, PKC, SGK e PAK1, regulando assim a proliferação celular, sobrevivência, metabolismo e expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762
• Desempenha um papel central na transdução de sinal da insulina ao fosforilar a AKT/PKB, que propaga sinais a jusante controlando a captação de glicose, captação de aminoácidos, armazenamento, proliferação celular e sobrevivência. Referências relacionadas: PMID:10226025, PMID:12167717, PMID:9094314
• A PDK1 regula negativamente a sinalização do TGF-beta ao modular interações e fosforilação de proteínas SMAD, e ao impedir a translocação nuclear de SMAD3 e SMAD4. Referências relacionadas: PMID:17327236
• Ativa a via NF-kappa-B via fosforilação de IKKB, contribuindo para respostas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:16207722
• A forma tirosina-fosforilada da PDK1 é crucial para a dinâmica das adesões focais em resposta à angiotensina II. Referências relacionadas: PMID:14585963
• A PDK1 é essencial para a motilidade e quimiotaxia de células endoteliais vasculares, desempenhando um papel na angiogênese. Referências relacionadas: PMID:17371830
• Localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular e adesões focais, refletindo seus papéis multifuncionais.
• A PDK1 é expressa de forma ubíqua; a forma fosforilada na Tyr-9 está elevada em tecidos doentes de pulmão, fígado, cólon e mama.
• O splicing alternativo produz uma isoforma cataliticamente inativa; a proteína sofre acetilação e conjugação semelhante à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosfo-específico correspondente aos resíduos ao redor da Ser241 da PDK1 humana; ele detecta a forma fosforilada. Para WB e IF/ICC, use inibidores de fosfatase em tampões de lise e fixação.
• Para WB, espera-se uma banda em ~63 kDa. Use lisados celulares estimulados vs. não estimulados (por exemplo, tratados com insulina) como controles positivo/negativo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos nessas espécies; valide a especificidade do anticorpo com controles apropriados.
• Para ELISA, considere usar um peptídeo fosforilado como padrão e um peptídeo não fosforilado para confirmar a especificidade fosfo.
• Otimize a diluição do anticorpo para cada aplicação; faixas iniciais sugeridas podem ser determinadas experimentalmente.

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