Fosfo-PKA C-alfa (PRKACA)-T197 pAb de Coelho - P17612

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKA C-alfa

• A subunidade catalítica alfa da proteína quinase dependente de cAMP (PRKACA) é uma serina/treonina quinase que fosforila numerosos substratos em resposta ao cAMP, regulando processos celulares chave, incluindo metabolismo, transcrição e ciclo celular (PubMed:15642694, PubMed:15905176, PubMed:16387847). Referências relacionadas: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847
• A PRKACA localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo citoplasma, núcleo, membrana celular, mitocôndria e cílios, permitindo sinalização espacialmente restrita.
• Existem duas isoformas: a isoforma 1 é expressa de forma ubíqua, enquanto a isoforma 2 é específica do esperma e enriquecida em espermatócitos paquítenos, refletindo funções teciduais distintas.
• A quinase é regulada pela dissociação mediada por cAMP das subunidades reguladoras e por fosforilação; é uma fosfoproteína com múltiplos sítios de modificação.
• A PRKACA atua como um inibidor chave da via de sinalização smoothened ao fosforilar fatores de transcrição GLI, impedindo sua ativação transcricional na ausência de ligantes hedgehog (PubMed:16705181). Referências relacionadas: PMID:16705181
• Mutações na PRKACA estão associadas à síndrome de Cushing, ilustrando seu papel crítico na regulação endócrina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético fosforilado que abrange a região T197; como um anticorpo específico para fosfo, considere validar a especificidade usando lisatos tratados com fosfatase juntamente com controles positivos.
• Para aplicações de WB, antecipe uma banda única em aproximadamente 41 kDa; inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar a fosforilação.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; o alinhamento de sequência do motivo T197 entre espécies é aconselhável para confirmar a conservação do epítopo.
• Experimentos de ELISA podem se beneficiar do revestimento com o peptídeo fosforilado e do uso de peptídeo não fosforilado como controle negativo para garantir a seletividade para fosfo.

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