Fosfo-PKC alfa-T410+PKC delta-T410 mAb de Coelho para WB, ELISA - P17252 / Q05655

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PKC alfa e PKC delta

• O PRKCA (PKC alfa) é uma serina/treonina proteína quinase dependente de cálcio, fosfolípides e DAG da família PKC, que também inclui o PRKCD (PKC delta). Regula a proliferação celular, apoptose, diferenciação, migração e adesão, e é altamente expresso em vários cancros, atuando como um promotor tumoral.
• O PRKCA fosforila substratos-chave como RAF1, BCL2 e TNNT2, modulando assim a cascata de sinalização MAPK/ERK e a apoptose. Por exemplo, a fosforilação do BCL2 promove a sobrevivência celular em células leucémicas.
• O PRKCA desempenha um papel crítico na motilidade celular: após lesão, transloca-se para lamelipódios e fosforila o CSPG4, induzindo o rearranjo do citoesqueleto e a migração polarizada.
• A quinase localiza-se no citoplasma, membrana celular, membrana mitocondrial e núcleo, sendo a translocação induzida por estímulos vital para as suas funções específicas do contexto.
• A fosforilação do loop de ativação (T410 no PKC delta, equivalente no PKC alfa) é essencial para a atividade da quinase. Este anticorpo monoclonal reconhece especificamente o PKC alfa e delta fosforilados no T410.
• No sistema cardiovascular, o PRKCA regula negativamente a contratilidade miocárdica e promove a angiogénese e a hipertrofia dos cardiomiócitos, em parte através da sinalização MAPK1/3, ligando-o à insuficiência cardíaca.
• O PRKCA fosforila o DOCK8 para controlar o CDC42 na migração de células T (PubMed:28028151) e fosforila o KLHL3 no transporte iónico renal (PubMed:25313067). Também ativa o LRRK1 para regular o tráfego de proteínas RAB (PubMed:36040231). Referências relacionadas:
  • PMID:28028151
  • PMID:25313067
  • PMID:36040231

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio foi um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos em torno do T410 do PRKCZ humano, que partilha homologia com as sequências do loop de ativação do PKC alfa e delta. Os utilizadores devem verificar se o anticorpo reconhece as fosfoproteínas esperadas no seu sistema.
• As aplicações recomendadas incluem WB e ELISA. Para WB, os pesos moleculares previstos são 76 kDa (PKC alfa) e 77 kDa (PKC delta). Use controlos positivos (por exemplo, células estimuladas com PMA) e negativos (tratadas com fosfatase ou não estimuladas) apropriados.
• Para confirmar a especificidade fosfo, considere realizar um tratamento com fosfatase dos lisados antes da análise WB.
• Para ELISA, siga os protocolos padrão de anticorpos fosfo e otimize as condições de revestimento e deteção para sensibilidade.
• Como o anticorpo é um monoclonal de coelho, oferece alta reprodutibilidade e consistência lote a lote, sendo adequado para estudos quantitativos.

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