Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-PKC (pan) (βII Ser660) para WB, ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P24723 / Q04759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC (pan) (βII Ser660)

• A família PKC compreende múltiplas isoformas de serina/treonina quinase (α, β, δ, ε, η, θ) que regulam processos celulares-chave; este anticorpo tem como alvo a forma fosforilada dessas isoformas em um sítio conservado correspondente a Ser660 na PKC α (PRKCA).
• A PKC α é ativada por cálcio, fosfolipídios e diacilglicerol (DAG), e funciona na regulação positiva e negativa da proliferação celular, apoptose e migração.
• No câncer, a PKC α atua como um proto-oncogene, promovendo o crescimento tumoral em gliomas e cânceres de mama, e exerce efeitos antiapoptóticos ao fosforilar BCL2 e suprimir vias mediadas por p53.
• No sistema imunológico, a PKC α regula a diferenciação de macrófagos e a migração de células T CD4+; ela fosforila DOCK8 para ativar CDC42 (PubMed:28028151). Referências relacionadas: PMID:28028151
• A PKC α transita entre o citoplasma, membrana plasmática, membrana mitocondrial e núcleo, sendo que a localização subcelular influencia seu acesso a substratos e função.
• No sistema cardiovascular, a PKC α regula a hipertrofia dos cardiomiócitos e a contratilidade através de vias envolvendo ERK1/2 e fosforilação da troponina cardíaca T (TNNT2).
• Modificações pós-traducionais principais incluem autofosforilação, transfosforilação e acetilação; a fosforilação em Ser660 é um sítio regulatório crítico para a atividade completa da quinase.
• A PKC α também está implicada na angiogênese, agregação plaquetária e inflamação, destacando seus diversos papéis fisiológicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado; use inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação. Confirme a especificidade fosfo tratando amostras com lambda fosfatase ou usando controles de bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Para Western blot, otimize as condições de bloqueio (por exemplo, BSA em vez de leite) para reduzir o ruído de fundo. Comece com uma diluição do anticorpo de 1:500–1:2000 e ajuste com base em resultados preliminares.
• Como um anticorpo policlonal, ele pode reconhecer múltiplas isoformas de PKC na faixa de peso molecular prevista; considere siRNA específico de isoforma ou inibidores para confirmar a identidade, se necessário.
• Para ELISA, garanta a compatibilidade dos antígenos de revestimento e valide com controles positivos e negativos conhecidos.
• Com reatividade cruzada para camundongo e rato, este anticorpo é adequado para modelos roedores; verifique a reatividade em seu tecido específico ou linhagem celular com controles apropriados.

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