pAb de coelho Phospho-PKCδ/θ-S643/676 - Q05655/Q04759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Protein kinase C delta type

• A proteína quinase C delta (PKCδ), codificada pelo gene PRKCD, é uma serina/treonina proteína quinase independente de cálcio e dependente de fosfolipídio e diacilglicerol (DAG), pertencente à subfamília de PKC nova. Também é conhecida como nPKC-delta e possui atividade de tirosina proteína quinase.
• A PKCδ desempenha papéis duplos na apoptose: atua como proteína pró-apoptótica durante a apoptose induzida por dano no DNA e como proteína anti-apoptótica durante a morte celular iniciada por receptor de citocina. Referências relacionadas: PMID:21406692, PMID:21810427
• Ela funciona como reguladora da proliferação de células B e é fundamental para a indução de tolerância de células B induzida por autoantígenos.
• Em resposta ao estresse oxidativo, a PKCδ fosforila e ativa CHUK/IKKA no núcleo, levando à fosforilação de p53/TP53 e à sinalização apoptótica a jusante. Referências relacionadas: PMID:21406692, PMID:21810427
• A PKCδ apresenta papéis contrastantes no câncer: pode atuar como supressor tumoral após estimulação mitogênica, no entanto, está altamente expressa em muitos tipos de câncer, promovendo a sobrevivência celular e a quimiorresistência por meio de vias que incluem NF-kappa-B, AKT1 e MAPK1/3. Referências relacionadas: PMID:15774464
• É necessária para a atividade da NADPH oxidase e a produção de ânion superóxido em neutrófilos e eosinófilos, envolvendo a fosforilação de NCF1 (p47-phox). Referências relacionadas: PMID:19801500, PMID:11748588
• A localização subcelular inclui citoplasma, região perinuclear, núcleo, membrana celular, mitocôndrias e sistema de endomembranas, refletindo seus papéis dinâmicos na sinalização.
• A PKCδ contém domínios característicos de dedo de zinco do tipo forbol éster/DAG e está sujeita a splicing alternativo, fosforilação e outras modificações pós-traducionais que regulam sua função e distribuição subcelular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo é produzido contra um fosfopeptídeo sintético correspondente a Ser643 da PKCδ humana (que compartilha homologia com Ser676 da PKCθ), espera-se que ele reconheça especificamente as formas fosforiladas de ambas as quinases. Confirme a reatividade cruzada com o alvo relevante no seu sistema modelo.
• Para Western blot, os pesos moleculares previstos incluem 77 kDa e outras isoformas (67, 74, 80, 81 kDa) devido ao splicing alternativo e modificações pós-traducionais. Inclua lisados tratados com fosfatase como controle negativo para verificar a fosfo-especificidade.
• A ativação e a fosforilação da PKCδ em Ser643 podem ser estimuladas por forbol ésteres (por exemplo, PMA), estresse oxidativo (por exemplo, H2O2) ou agentes danificadores do DNA. Considere condições de estimulação adequadas ao preparar lisados de células ou tecidos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção de Phospho-PKCδ/θ em lisados celulares ou proteínas purificadas. Otimize as condições de revestimento e detecção de acordo com os procedimentos padrão.

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