pAb de coelho para Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783 para WB, ELISA - P19174

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783

• PLCG1 codifica 1-fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato fosfodiesterase gama-1, uma enzima chave na sinalização por fosfoinositídeos. Ela hidrolisa PIP2 para gerar os segundos mensageiros DAG e IP3, que mobilizam cálcio e ativam a proteína quinase C.
• É ativada a jusante de receptores tirosina quinases (ex: PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs), desempenhando um papel crítico na transdução de sinais de fatores de crescimento para vias intracelulares.
• PLCG1 participa da reorganização de actina e da migração celular, conforme demonstrado pela sua exigência para quimiotaxia eficiente (PubMed:17229814). Referências relacionadas: PMID:17229814
• A proteína se localiza em lamelípodes e dobras de membrana, estruturas dinâmicas na borda dianteira de células em migração, ressaltando o seu papel na regulação do citoesqueleto.
• PLCG1 contém domínios SH2 e SH3 que mediam interações com resíduos de tirosina fosforilados em receptores ativados, e ela própria é fosforilada em resíduos de tirosina chave (incluindo Y783) para ativação completa.
• Ela está sujeita a várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, e é classificada como fosfoproteína, hidrolase e transdutor.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é produzido contra um peptídeo fosforilado; portanto, ele reconhece especificamente a PLCG1 fosforilada em Y783. Para controles negativos, trate as amostras com lambda fosfatase ou use competição com peptídeo não fosforilado para confirmar a especificidade.
• No Western blot, o peso molecular previsto de PLCG1 é de ~149 kDa. Garanta a separação adequada de proteínas de alto peso molecular usando porcentagem de gel apropriada (ex: SDS-PAGE a 6-8%) e condições de transferência adequadas.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como anticorpo de detecção em formato de ELISA sanduíche fosfo-específico. Valide no sistema de amostra relevante, como lisados de células estimuladas vs. não estimuladas.
• Ao detectar a fosforilação endógena de PLCG1, considere estimular as células com fatores de crescimento (ex: EGF, PDGF) conhecidos por ativarem receptores tirosina quinases que fosforilam PLCG1 em Y783.
• A reatividade cruzada com camundongo está indicada; no entanto, confirme a reatividade no seu modelo experimental específico e valide o anticorpo para outras espécies, se necessário.
• Como o anticorpo é policlonal de coelho, pode ocorrer variabilidade entre lotes; inclua controles adequados e faça a titulação para encontrar a concentração ótima.

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