Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-PLN-S16/T17 para WB, ELISA - P26678

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fosfolambano

• O Fosfolambano (PLN) é um regulador chave da contratilidade do músculo cardíaco, codificado pelo gene PLN, com um peso molecular de aproximadamente 6 kDa (UniProt: P26678).
• Ele inibe reversivelmente a Ca2+-ATPase 2 do retículo sarcoplasmático/endoplasmático (SERCA2/ATP2A2) no retículo sarcoplasmático cardíaco, reduzindo a afinidade aparente por Ca2+ da bomba, particularmente durante a diástole. Referências relacionadas: PMID:28890335
• A fosforilação do PLN em Ser16 e Thr17 alivia a inibição da SERCA2, promovendo a recaptação de Ca2+ para o retículo sarcoplasmático e acelerando o relaxamento muscular.
• Subcelularmente, o PLN localiza-se no retículo endoplasmático, retículo sarcoplasmático e membranas mitocondriais, consistente com seus papéis no manuseio intracelular de Ca2+.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação (em Ser16/Thr17), acetilação e palmitoilagem, que modulam sua atividade e associação à membrana.
• O PLN é predominantemente expresso no músculo cardíaco, mas também desempenha papéis em espermátides alongadas e no núcleo reticular do tálamo do cérebro, influenciando a diferenciação de células germinativas e padrões de sono, respectivamente.
• Mutações no PLN estão associadas a cardiomiopatias (CMD1P, CMH18), destacando seu papel crítico na função cardíaca.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é um fosfopeptídeo sintético que abrange Ser16 e Thr17, espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma duplamente fosforilada do PLN; valide a especificidade usando controles desfosforilados ou tratamento com fosfatase em sistemas de amostra relevantes.
• Para análise de Western blot, use marcadores de baixo peso molecular e considere géis de Tris-Tricina de 15-20% para resolver a banda de 6 kDa do PLN; inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação.
• Para ELISA, o revestimento com conjugados de fosfopeptídeo e o uso de peptídeos competitivos ou bloqueadores podem ajudar a confirmar a fosfoespecificidade.
• Otimize empiricamente a diluição do anticorpo para cada aplicação; a inclusão de controles positivos e negativos apropriados é recomendada para confirmar a reatividade dependente de fosfato.

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