Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-PPP1R12A-S668 para WB, ELISA - O14974

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PPP1R12A

• O PPP1R12A, também conhecido como MYPT1 (subunidade alvo 1 da fosfatase de miosina), é a subunidade reguladora 12A da proteína fosfatase 1 (PP1), uma fosfatase chave de Ser/Thr.
• Funciona como um andaime que direciona a subunidade catalítica da PP1 (PPP1C) para a miosina, permitindo a desfosforilação das cadeias leves regulatórias da miosina e a regulação da contratilidade da actomiosina.
• Como parte do complexo da fosfatase de miosina, o PPP1R12A está envolvido na desfosforilação da PLK1, contribuindo para o controle da progressão mitótica.
• A proteína é capaz de inibir a supressão dependente de HIF1AN (fator inibidor de HIF-1α) da atividade de HIF1A, potencialmente ligando a sinalização do citoesqueleto às respostas à hipóxia.
• A localização subcelular inclui o citoplasma e as fibras de estresse, consistente com o seu papel na dinâmica do citoesqueleto de actomiosina.
• Expresso em músculos estriados, especificamente em fibras do tipo 2a, destacando a sua importância na contratilidade muscular.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação em múltiplos sítios (incluindo S668) e hidroxilação, que modulam a sua atividade e interações.
• O gene PPP1R12A (MBS, MYPT1) mapeia para o cromossomo 12 humano e produz isoformas de splicing alternativas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno da Ser668, espera-se que o anticorpo reconheça especificamente o PPP1R12A fosforilado neste resíduo. Certifique-se de incluir inibidores de fosfatases nos tampões de lise para preservar a fosforilação.
• Para o Western blot, é prevista uma banda em aproximadamente 115 kDa. Considere carregar 20–30 µg de lisado de células ou tecidos e usar controles apropriados, como amostras tratadas com fosfatase, para confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada de espécies é prevista para humano, camundongo e rato com base na homologia de sequência; no entanto, recomenda-se a validação no sistema experimental relevante.
• O anticorpo pode ser adequado para ELISA; como com todos os anticorpos específicos para fosfo, combine com um anticorpo de proteína total para normalização em ensaios semiquantitativos.

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