Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-PPP1R12A/PPP1R12B/PPP1R12C (Thr696) para WB, ELISA - O14974 / O60237 / Q9BZL4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PPP1R12A/PPP1R12B/PPP1R12C

• PPP1R12A (também conhecido como MYPT1) é uma subunidade reguladora chave da proteína fosfatase 1 (PP1), direcionando a subunidade catalítica (PPP1C) para substratos específicos.
• Medeia a ligação à miosina e regula a dinâmica do citoesqueleto, particularmente em fibras de estresse, como parte do complexo fosfatase de miosina.
• A proteína contém repetições ANK e está envolvida na desfosforilação de PLK1, impactando a progressão do ciclo celular.
• PPP1R12A pode inibir a supressão dependente de HIF1AN de HIF1A, modulando assim vias de resposta hipóxica.
• A expressão é proeminente em músculos estriados, especialmente fibras tipo 2a, indicando um papel na regulação da contração muscular.
• O gene sofre splicing alternativo, produzindo isoformas funcionalmente distintas.
• Palavras-chave: Fosfoproteína, hidroxilação e sequenciamento direto de proteínas; destacando modificações pós-traducionais que regulam sua atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor do Thr696 de PPP1R12A humano. Este sítio é conservado em PPP1R12B e PPP1R12C.
• Para Western blot, inclua inibidores de fosfatases no tampão de lise para preservar o estado de fosforilação. Considere usar lisato tratado com fosfatase como controle negativo.
• Valide a especificidade do anticorpo em linhagens de células humanas relevantes conhecidas por expressar esses alvos da fosfatase de miosina, como células HeLa ou A431.
• A fosforilação em Thr696 pode ser induzida por estímulos específicos; otimizar as condições de estímulo pode melhorar a detecção do sinal.
• Para ELISA, use revestimento com antígeno peptídeo fosforilado e compare com peptídeo não fosforilado para confirmar a especificidade.

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