Fosfo-PRKCQ-S676 pAb de coelho - Q04759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PRKCQ

• PRKCQ (Proteína quinase C tipo teta), também conhecida como nPKC-theta, é uma serina/treonina-proteína quinase dependente de fosfolipídios e diacilglicerol, independente de cálcio, codificada pelo gene PRKCQ. Desempenha papéis não redundantes na sinalização do receptor de células T (TCR), sendo essencial para ativação, proliferação, diferenciação e sobrevivência de células T. Referências relacionadas: PMID:21964608
• Em células T coestimuladas por TCR-CD3/CD28, PRKCQ é necessária para a ativação de NF-kappa-B e JUN, levando à produção de IL2, e participa da transativação dependente de cálcio de NFATC1 e NFATC2. Referências relacionadas: PMID:21964608
• PRKCQ fosforila diretamente CARD11 em resíduos de serina, promovendo a associação de CARD11 com as plataformas lipídicas e o recrutamento do complexo BCL10-MALT1 para ativar a via canônica de NF-kappa-B. Ela também fosforila STK39/SPAK para mediar a ativação de JUN. Referências relacionadas: PMID:21964608
• Além das células T, PRKCQ regula a transdução de sinal em plaquetas downstream dos receptores ITGA2B, CD36/GP4, F2R/PAR1 e F2RL3/PAR4, desempenhando um papel positivo na sinalização de "fora para dentro" e na secreção de grânulos. Ela também pode inibir a sinalização de insulina por fosforilação de IRS1. Além disso, PRKCQ fosforila MSN, PDPK1, CCDC88A/GIV e LRRK1, impactando diversos processos celulares. Referências relacionadas: PMID:23509302, PMID:36040231
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática, com translocação dependente de estímulo para a membrana celular, o que é consistente com seu papel na transdução de sinais de receptores da superfície celular.
• A expressão tecidual é proeminente no músculo esquelético, células T, células megacarioblásticas e plaquetas, alinhando-se com suas funções chave em células imunes e músculo.
• Este anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo correspondente aos resíduos ao redor da serina 676 da PRKCQ humana, permitindo a detecção específica da forma fosforilada. A serina 676 é um sítio de fosforilação crítico envolvido na ativação da PRKCQ e na sinalização downstream.
• As modificações pós-traducionais da PRKCQ incluem fosforilação, ubiquitinação e formação de ligação isopeptídica, conforme indicado pelas palavras-chave Fosfoproteína, Ligação isopeptídica e conjugação Ubl. A proteína também apresenta domínios de dedo de zinco, ligação a ATP e atividade quinásica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para aplicações de Western blot, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar o status de fosforilação da PRKCQ na Ser-676.
• A natureza fosfo-específica do anticorpo requer validação cuidadosa; considere o uso de um controle de bloqueio com peptídeo não fosforilado ou tratamento com fosfatase para confirmar a especificidade.
• No ELISA, a cobertura com peptídeos fosforilados versus não fosforilados pode ajudar a avaliar a seletividade do anticorpo.
• Como anticorpo policlonal de coelho, a detecção requer um conjugado secundário de IgG anti-coelho; otimize empiricamente as diluições dos anticorpos primário e secundário para cada ensaio.
• Dado o peso molecular de 82 kDa da PRKCQ, escolha porcentagens de gel e condições de transferência adequadas para garantir resolução e detecção eficientes.

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