Anticorpo monoclonal de coelho Phospho-Raptor-Ser792 para WB, ELISA - Q8N122

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da proteína associada regulatória do mTOR

• RPTOR é um componente chave do alvo mecanístico do complexo rapamicina 1 (mTORC1), que atua como um sensor central de nutrientes estimulando reações anabólicas e o crescimento celular. Referências relacionadas: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• Em resposta a nutrientes e fatores de crescimento, o mTORC1 é recrutado para a membrana do lisossomo, onde RPTOR medeia esse recrutamento por meio da interação com GTPases Rag. Referências relacionadas: PMID:12747827 PMID:24403073 PMID:26588989
• RPTOR promove especificidade de substrato ao se ligar a proteínas que contêm o motivo TOS e direcioná-las para o domínio quinase do MTOR para fosforilação, incluindo os efetores downstream chave RPS6KB1 e EIF4EBP1. Referências relacionadas: PMID:12747827
• O mTORC1 também inibe vias catabólicas ao fosforilar componentes de iniciação da autofagia ULK1 e ATG13, bem como o fator de transcrição TFEB. Referências relacionadas: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• A proteína se localiza na membrana do lisossomo, citoplasma e grânulos citoplasmáticos, o que é consistente com seu papel dinâmico na detecção de nutrientes.
• RPTOR é uma fosfoproteína (como indicado na sua anotação de palavra-chave), sujeita a modificações regulatórias pós-traducionais; acetilação e ubiquitinação também foram observadas.
• Altamente expresso no músculo esquelético, com menor expressão no cérebro, pulmão, intestino delgado, rim e placenta; amplamente expresso em todos os tecidos, com níveis mais altos na mucosa nasal e na hipófise.
• Os aliases do gene incluem KOG1 e Mip1; a proteína também é conhecida como proteína de suporte p150 alvo da rapamicina (TOR).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente ao sítio fosforilado Ser792; para WB, use linhas de células humanas como HeLa ou HEK293 que são conhecidas por expressar RPTOR.
• Valide a fosforo-especificidade tratando lisados de células com fosfatase lambda para confirmar a perda do sinal, ou usando competição com peptídeo não fosforilado no ELISA.
• Para ELISA, considere a cobertura com o peptídeo fosforilado e a detecção com o anticorpo; otimize a concentração de cobertura e as condições de bloqueio.
• RPTOR é uma proteína de grande tamanho (~149 kDa); garanta uma transferência de proteína adequada e use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, 6-8% de SDS-PAGE) para WB.

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