Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Phospho-SHC1-Y427 - P29353

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SHC1

• O gene SHC1 codifica três isoformas principais—p46Shc, p52Shc e p66Shc—geradas por splicing alternativo e uso de promotor alternativo.
• As isoformas p46Shc e p52Shc acoplam receptores tirosina quinase ativados à via de sinalização Ras, recrutando o complexo GRB2/SOS, propagando assim sinais mitogênicos.
• A isoforma p66Shc não está envolvida na ativação de Ras, mas media respostas ao estresse oxidativo e apoptose; atua a jusante de p53 para aumentar oxidantes intracelulares e liberação de citocromo c.
• O SHC1 participa na sinalização do receptor de angiopoietina TEK/TIE2, regulando a migração de células endoteliais e a angiogênese por brotamento.
• Está envolvido na sinalização mediada por oncostatina-M através do receptor de OSM tipo II, contribuindo para a ativação da via Ras/Raf/MAPK via recrutamento dependente de JAK1 para a subunidade OSMR e associação do SHC1 com GRB2. Referências relacionadas: PMID:11016927
• O SHC1 localiza-se no citoplasma, nas adesões focais e na matriz mitocondrial, refletindo seus diversos papéis na sinalização.
• A proteína é amplamente expressa, notadamente em células-tronco neurais, mas está ausente em neurônios maduros.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem fosforilação (é uma fosfoproteína) e acetilação; contém um domínio SH2 essencial para interações proteína-proteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno da Y427, permitindo a detecção específica da fosforilação neste resíduo. Para Western blot, considere usar controles fosfo-específicos e de proteína total para confirmar a identidade da banda.
• Valide o desempenho do anticorpo em linhagens celulares humanas ou de camundongo relevantes estimuladas com fatores de crescimento apropriados (ex.: EGF, PDGF) para induzir a fosforilação do SHC1.
• Para ELISA, confirme a especificidade por inibição competitiva com o peptídeo fosforilado versus não fosforilado.
• Otimize a diluição do anticorpo primário e as condições de bloqueio; uma diluição inicial típica para WB pode ser 1:500–1:2000, mas a determinação empírica no seu sistema é recomendada.
• Como o SHC1 está envolvido em múltiplas cascatas de sinalização, interprete os resultados no contexto da via completa e de potenciais mecanismos de feedback.

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