Phospho-SHP2-Y542 Rabbit pAb - Q06124

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SHP2

• O SHP2 (PTPN11) atua a jusante de várias tirosinas quinases de receptores e proteínas citoplasmáticas, retransmitindo sinais da superfície celular para o núcleo e regulando positivamente a via MAPK.
  Referências relacionadas: PMID:10655584, PMID:14739280, PMID:18559669
• Desfosforila múltiplos substratos, incluindo GAB1, ARHGAP35, EGFR, ROCK2, CDC73 e SOX9, modulando assim diversos processos celulares.
  Referências relacionadas: PMID:28074573, PMID:18559669, PMID:26742426
• Em células T, o SHP2 é recrutado pelo PDCD1 fosforilado para inibir a sinalização do receptor de células T (TCR) através da defosforilação de moléculas de sinalização próximas chave.
  Referências relacionadas: PMID:32184441
• A proteína localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus papéis na transdução de sinais e regulação transcricional.
• Amplamente expresso, com os níveis mais altos observados no coração, cérebro e músculo esquelético.
• Contém dois domínios SH2 na extremidade N-terminal e um domínio de tirosina fosfatase na extremidade C-terminal; as modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que regulam sua atividade e interações.
• O PTPN11 é anotado com palavras-chave como variante da doença e surdez, indicando seu envolvimento em patologias humanas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo sintético que abrange a Y542 fosforilada do SHP2 humano; foi desenhado para reconhecer especificamente a forma fosforilada em Y542.
• Para Western blot, inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise e considere executar controles desfosforilados (por exemplo, lisatos tratados com fosfatase) para confirmar a especificidade fosfo-específica.
• As aplicações validadas incluem WB e ELISA usando amostras humanas, de camundongo e de rato. A reatividade cruzada com camundongo e rato é esperada devido à alta homologia de sequência ao redor do sítio Y542.
• Em aplicações de ELISA, o revestimento com o peptídeo fosforilado ou o uso de um ensaio de inibição competitiva por peptídeo pode ajudar a verificar a especificidade.
• Use um anticorpo secundário anti-coelho compatível e otimize empiricamente as diluições do anticorpo primário para o seu sistema experimental.

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