mAb de coelho Phospho-Smad2 (S245/S250/S255) para WB e ELISA - Q15796

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de SMAD2

• SMAD2 (homólogo 2 de Mothers against decapentaplegic) é um SMAD regulado por receptor (R-SMAD) que funciona como transdutor de sinal intracelular e modulador transcricional para TGF-beta (fator de crescimento transformador) e as cinases do receptor tipo 1 da activina.
• Após fosforilação em seu motivo SXS C-terminal (resíduos de serina 465 e 467), SMAD2 forma um complexo com SMAD4 e se transloca para o núcleo, onde se liga ao elemento responsivo à TGF-beta (TRE) nos promotores de genes alvo para regular a transcrição.
• SMAD2 regula positivamente a atividade da cinase PDPK1 ao estimular sua dissociação da proteína inibitória 14-3-3 YWHAQ.
• Ele está implicado como supressor tumoral no carcinoma colorretal. Referências relacionadas: PMID:8752209
• Subcelularmente, SMAD2 circula entre o citoplasma e o núcleo, o que é consistente com seu papel na transdução de sinal.
• A proteína é expressa em altos níveis no músculo esquelético, células endoteliais, coração e placenta.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade, estabilidade e interações.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína contém um domínio de ligação ao íon zinco (domínio MH1) que medeia a ligação ao DNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra um peptídeo fosforilado; os tampões de lise da amostra devem incluir inibidores de fosfatases (ex.: ortovanadato de sódio, fluoreto de sódio) para manter o estado de fosforilação durante o preparo.
• Para Western blotting, considere executar lisados de células não tratadas e estimuladas com TGF-β/activina para confirmar as mudanças de banda dependentes da ativação.
• Uma diluição inicial recomendada para WB é 1:500–1:2000, mas a concentração ótima deve ser determinada empiricamente no seu sistema de amostra específico.
• Em ELISA, o uso de um tampão de bloqueio com baixa atividade de fosfatase pode reduzir o fundo; considere um ensaio competitivo com peptídeo fosforilado para verificar a especificidade.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, use um anticorpo secundário anti-IgG de coelho (H+L) conjugado a HRP ou AP para detecção.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integral

A CamelBio faz parceria com fabricantes de diagnósticos e institutos de pesquisa para fornecer um portfólio abrangente de matérias-primas para DPI, incluindo pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados e reagentes auxiliares a granel. Para projetos direcionados à via de sinalização TGF-beta ou detecção de phospho-SMAD2, a CamelBio oferece suporte de fornecimento personalizado para acelerar o desenvolvimento do seu ensaio, do conceito à clínica.