Fosfo-Smad2-S465/S467 + Smad3-S423/S425 Anticorpo mAb de Coelho para WB, ELISA - Q15796/P84022

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMAD2

• O SMAD2 (homólogo 2 de Mothers against decapentaplegic), também conhecido como MADH2 ou MADR2, é um SMAD regulado por receptor (R-SMAD) que serve como transdutor de sinal intracelular para as quinases do receptor tipo 1 de TGF-beta e activina.
• Ao ligar o ligante, o SMAD2 é fosforilado nos resíduos de serina C-terminais S465/S467, levando à formação de complexo com o SMAD4 e translocação nuclear, onde se liga a elementos TRE para regular a transcrição gênica.
• Modula positivamente a atividade da quinase PDPK1, promovendo a dissociação da proteína 14-3-3 YWHAQ, um regulador negativo chave.
• O SMAD2 pode funcionar como um supressor de tumor em carcinoma colorretal. Referências relacionadas: PMID:8752209
• Subcelularmente, o SMAD2 localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, com trânsito dinâmico controlado pelo estado de fosforilação.
• A expressão tecidual é proeminente no músculo esquelético, células endoteliais, coração e placenta.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, ajustam finamente a atividade e estabilidade do SMAD2.
• Este anticorpo detecta a dupla fosforilação em S465/S467 do SMAD2 e nos sítios homólogos S423/S425 do SMAD3, ambos críticos para a ativação na transdução de sinal TGF-beta.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo monoclonal de coelho foi produzido contra um fosfopeptídeo sintético circundante a S465/S467 do SMAD2 humano, garantindo especificidade para o estado fosforilado ativado.
• Para Western blotting, inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise para preservar a fosforilação do alvo. Bandas principais esperadas: ~52 kDa (SMAD2) e ~48 kDa (SMAD3); bandas adicionais em ~25, 35 e 43 kDa podem representar produtos de clivagem ou isoformas. Verifique a especificidade com controles tratados com fosfatase ou knockdown por siRNA.
• Para ELISA, considere normalizar o sinal de fosfo para os níveis totais de SMAD2/3 usando um anticorpo pan; otimize as condições experimentais empiricamente.
• A reatividade cruzada foi observada com proteínas humanas, de camundongo e rato; confirme os níveis de fosforilação endógena em seu sistema experimental com estimulação apropriada de TGF-beta.

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