Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-Smad5-S465 para WB, ELISA - Q99717

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad5

• SMAD5 (Homolog 5 contramãe contra decapentapléxico, também conhecido como JV5-1, MADH5) é um membro da família SMAD de reguladores transcricionais.
• Após estimulação pelo ligante BMP, o SMAD5 é fosforilado em Ser465 por receptores BMP de tipo I ativados, permitindo a formação de complexo com SMAD4 e translocação nuclear para regular a transcrição.
  Referências relacionadas: PMID:9442019
• O complexo SMAD ativado liga-se aos Elementos de Ligação Smad (SBEs) nos promotores dos genes alvo para modular o resultado da rede de sinalização.
  Referências relacionadas: PMID:33510867
• SMAD5 desempenha papéis essenciais no desenvolvimento embrionário, diferenciação celular, angiogênese e homeostase tecidual.
  Referências relacionadas: PMID:12064918 PMID:16516194
• SMAD5 não fosforilado tem função citoplasmática e mitocondrial no metabolismo energético, promovendo a respiração mitocondrial e a glicólise por meio da interação com a hexocinase 1.
  Referências relacionadas: PMID:28675158
• SMAD5 é expresso de forma ubíqua e se localiza no citoplasma, núcleo e mitocôndria.
• A proteína sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, e contém um domínio de ligação a zinco essencial para a interação com o DNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi desenvolvido contra um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor da Ser465 do Smad5 humano, garantindo a detecção específica da forma fosforilada.
• Para Western blotting, utilize protocolos padrão com membranas de PVDF ou nitrocelulose; considere a inclusão de inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar o estado de fosforilação.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; otimize as condições de revestimento e detecção para o formato específico do ensaio.
• A reatividade cruzada com Smad5 de humano, camundongo e rato foi confirmada; valide na espécie e tipo de amostra relevantes antes do uso experimental.
• O peso molecular previsto do Smad5 é de aproximadamente 52 kDa; uma banda nesse tamanho confirma a especificidade.

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