Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Phospho-STAT1-Y701 para WB e ELISA - P42224

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do STAT1

• Transdutor de sinal e ativador de transcrição que media respostas celulares a interferons (IFNs), à citocina KITLG/SCF e outras citocinas e fatores de crescimento. Desempenha um papel central nas cascatas de sinalização JAK-STAT. Referências relacionadas: PMID:12764129, PMID:12855578, PMID:15322115
• Após estímulo com IFN tipo I (IFN-alfa/beta), o STAT1 é tirosina-fosforilado em Y701 por quinases JAK, dimeriza com STAT2 e IRF9 para formar o complexo ISGF3, que transloca para o núcleo e se liga a elementos ISRE para induzir genes estimulados por interferon (ISGs) e estabelecer um estado antiviral. Referências relacionadas: PMID:28753426, PMID:35568036
• Em resposta ao IFN tipo II (IFN-gama), o STAT1 forma um homodímero (GAF) que se liga a elementos GAS, direcionando a transcrição de genes alvo. Eventos de fosforilação de tirosina e serina são críticos para esta ativação. Referências relacionadas: PMID:8156998, PMID:26479788
• Ativado pela sinalização KITLG/SCF-KIT, expandindo seu papel além dos interferons. Referências relacionadas: PMID:15526160
• Participa da sinalização mediada por FGFR, potencialmente através de interação direta ou efeitos a jusante. Referências relacionadas: PMID:19088846
• Após endocitose do TLR4, o STAT1 é fosforilado em Thr-749 por IKBKB, promovendo a transcrição de ARID5A e IL12B, ligando sinais imunes inatos à expressão de genes inflamatórios. Referências relacionadas: PMID:32209697
• Faz "shuttle" entre citoplasma e núcleo; a importação nuclear é estritamente regulada pelo estado de fosforilação. Contém o domínio SH2 conservado e o domínio de ligação ao DNA característicos dos membros da família STAT.
• Também implicado na tolerância imune intestinal: associa-se ao fragmento p13 da Gasdermina-D para promover a transcrição de CIITA e a diferenciação de células Tr1 (por similaridade).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético fosforilado em torno de Y701 do STAT1 humano; considere empregar competição com peptídeo não fosforilado ou tratamento com fosfatase para confirmar a especificidade da fosforilação em seus ensaios.
• Para western blot, o STAT1 migra aproximadamente a 87 kDa. Use marcadores de peso molecular apropriados e valide as bandas em condições redutoras.
• Em aplicações de ELISA, formatos de detecção direta ou indireta podem ser testados; revestir com peptídeo fosforilado e detectar com anticorpo secundário conjugado a HRP é uma abordagem comum.
• Como a ativação do STAT1 é dependente de estímulo, trate células com interferon (por exemplo, IFN-alfa ou IFN-gama) para induzir a fosforilação de Y701 antes da lise para uma detecção robusta.
• A reatividade cruzada com humano, camundongo e rato está documentada; para outras espécies, alinhe a sequência alvo em torno de Y701 para avaliar a reatividade potencial.

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