Fosfo-STAT3-Y705 pAb de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P40763

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do STAT3

• O STAT3 é um transdutor de sinal crítico e ativador de transcrição que medeia as respostas celulares a interleucinas, KITLG/SCF, LEP e outros fatores de crescimento, com papéis documentados nas vias de sinalização de IL-6, IL-31 e oncostatina-M. Referências relacionadas: PMID:10688651, PMID:11294841, PMID:12359225, PMID:15194700, PMID:9188471
• Após a ativação, o STAT3 recruta coativadores como NCOA1 ou MED1 para os promotores de genes alvo, regulando assim a transcrição a jusante. Referências relacionadas: PMID:15653507, PMID:16285960, PMID:17344214
• O STAT3 desempenha um papel fundamental na regulação imune, controlando a diferenciação de células T CD4+ ingénuas em células Th17 ou células T reguladoras, um processo modulado por eventos de acetilação e desacetilação/oxidação. Referências relacionadas: PMID:28065600, PMID:28262505
• Na regulação do ciclo celular, o STAT3 induz a expressão de CCND1, facilitando a transição da fase G1 para a fase S. Referências relacionadas: PMID:17344214
• O STAT3 citoplasmático reprime a macroautofagia ao inibir a atividade de EIF2AK2/PKR, enquanto sob estímulo de LEP pode promover a apoptose através da transativação de BIRC5. Referências relacionadas: PMID:23084476, PMID:18242580
• O STAT3 transita dinamicamente entre o citoplasma e o núcleo; a localização nuclear é essencial para as suas funções de regulação transcricional.
• O STAT3 exibe expressão tecidual ampla, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas, e é encontrado em células T CD4+ ingénuas, bem como em subconjuntos de células T auxiliares. Referências relacionadas: PMID:31899195
• Modificações pós-traducionais chave do STAT3 incluem a fosforilação em Y705 (crítica para a ativação), acetilação, metilação e modificações semelhantes à ubiquitinação, consistentes com a sua regulação multifacetada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é gerado contra um peptídeo fosforilado sintético correspondente ao Y705 do STAT3 humano; espera-se que reconheça especificamente a forma fosforilada na tirosina-705. Valide a especificidade usando tratamento com fosfatase ou mutantes deficientes em fosforilação no seu sistema experimental.
• Para Western blotting, a banda prevista está em aproximadamente 88 kDa. Bandas adicionais podem aparecer devido a modificações pós-traducionais ou proteínas interativas; são recomendados controlos apropriados.
• Em IHC-P, otimize a recuperação de antigénio e os passos de bloqueio. As condições de deteção específicas para fosfo podem melhorar o sinal; considere inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra.
• Para aplicações de ELISA, pode ser utilizado o revestimento com o imunogénio peptídeo fosforilado ou a captura de STAT3 fosforilado a partir de lisados celulares. Aconselha-se a titulação para determinar a concentração ótima do anticorpo.
• A reatividade cruzada relatada com STAT3 de camundongo e rato permite estudos multiespécies; no entanto, verifique a especificidade em amostras não humanas, pois variações de sequência podem influenciar a ligação.

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