Anticorpo Policlogal de Coelho Phospho-STK11-S334 para WB, ELISA - Q15831

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de STK11 (LKB1)

• STK11 (também conhecido como LKB1 ou hLKB1) é uma serina/treonina-proteína quinase supressora de tumor que controla membros da família AMPK, desempenhando papéis críticos no metabolismo celular, polaridade, apoptose e resposta ao dano ao DNA. Referências relacionadas: PMID:12805220, PMID:14517248, PMID:14976552
• Ele fosforila o loop T de proteínas da família AMPK, incluindo PRKAA1, PRKAA2, BRSK1 e quinases MARK, ativando-as e regulando vias metabólicas e de polaridade downstream.
• Ele também fosforila proteínas que não pertencem à família AMPK, como STRADA, PTEN e possivelmente p53/TP53, ligando sua atividade a redes de sinalização mais amplas. Referências relacionadas: PMID:11430832, PMID:15987703
• STK11 funciona como um regulador upstream chave da AMPK, mediando respostas ao estresse energético, homeostase da glicose no fígado, indução da autofagia e diferenciação de células B nos centros germinativos. Referências relacionadas: PMID:14976552
• A quinase está envolvida na resposta ao dano ao DNA ao interagir com p53 e regular a transcrição de CDKN1A/WAF1, e se transloca para as mitocôndrias durante a apoptose. Referências relacionadas: PMID:11430832, PMID:17108107, PMID:21317932
• Ele contribui para o reparo do DNA induzido pela radiação UV ao fosforilar CDKN1A em associação com NUAK1, promovendo a degradação de CDKN1A para um reparo ideal. Referências relacionadas: PMID:25329316
• Subcelularmente, STK11 é encontrado no núcleo, citoplasma, membrana, mitocôndria e endossomos tardios, o que é consistente com seus diversos papéis regulatórios.
• É expresso de forma ubíqua, com níveis mais fortes no testículo e fígado fetal, e tem um papel específico na espermiogênese.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético ao redor de Ser334 de STK11 humano; portanto, ele reconhece especificamente a forma fosforilada neste resíduo.
• Para Western blot, inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar a fosforilação. Considere estimular as células com agentes que ativam as vias STK11/LKB1 (por exemplo, estresse energético) para aumentar o sinal.
• Valide a especificidade do anticorpo usando tratamento com fosfatase ou competição com peptídeos fosforilados versus não fosforilados.
• Como a reatividade cruzada é reportada para camundongo e rato, o anticorpo pode ser usado para detecção de proteínas ortólogas; no entanto, confirme o alinhamento do sítio Ser334 entre as espécies.
• Para ELISA, use protocolos apropriados de revestimento e detecção com controles específicos para fosforilação. Otimize as diluições do anticorpo empiricamente para as condições do seu ensaio.

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