Anticorpo policlonal de coelho Phospho-Tirosina Hidroxilase-S40 para WB, ELISA - P07101

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Tirosina Hidroxilase (TH)

• A tirosina hidroxilase (TH), codificada pelo gene TH, também é conhecida como tirosina 3-monooxigenase. É a enzima limitante da taxa de biossíntese de catecolaminas, produzindo dopamina, noradrenalina e adrenalina.
• TH catalisa a hidroxilação da L-tirosina em L-DOPA usando tetrahidrobiopterina (BH4) e oxigênio molecular como co-substratos, uma etapa crítica para a síntese de neurotransmissores. Referências relacionadas: PMID:15287903 PMID:1680128 PMID:17391063 PMID:24753243 PMID:34922205 PMID:8528210
• Além da tirosina, TH pode hidroxilar fenilalanina e triptofano com menor especificidade, embora seu papel fisiológico principal seja a produção de catecolaminas.
• O splicing alternativo gera isoformas que não possuem atividade catalítica, que podem funcionar como subunidades reguladoras ou moduladores dominantes negativos.
• TH é expressa predominantemente no cérebro e nas glândulas adrenais, alinhando-se ao seu papel na síntese de catecolaminas neuronais e hormonais.
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o citoplasma, região perinuclear, núcleo, terminações axonais e vesículas sinápticas, indicando transporte dinâmico.
• TH é uma fosfoproteína, e a fosforilação em resíduos como a serina 40 (S40) modula a atividade enzimática e a produção de catecolaminas.
• Como membro da família das aminoácidos aromáticos hidroxilases dependentes de biopterina, TH requer ferro como cofator para catálise e está implicada em distúrbios neurológicos como a doença de Parkinson e distonia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor de Ser40 da TH humana. Confirme a especificidade de fosforilação usando amostras tratadas com fosfatase ou bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Para Western blot (WB), o peso proteico da TH é observado entre 45–59 kDa devido a fosforilação, splicing alternativo ou modificações pós-traducionais. Valide o tamanho da banda no seu sistema de amostras.
• Em aplicações de ELISA, considere usar o anticorpo para detectar TH fosforilada em lisados de células ou tecidos. Faça a titulação do anticorpo para otimizar a relação sinal-ruído.
• O anticorpo apresenta reação cruzada com TH de rato. Ao trabalhar com outras espécies, verifique a reação cruzada, pois a homologia de sequência pode afetar o reconhecimento.
• Armazene e manuseie conforme recomendado (enviado com sacos de gelo) para preservar a estabilidade e a atividade do anticorpo.

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