mAb de Coelho Anti-Fosfo-VASP-S157 para WB, ELISA - P50552

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Estimulada por Vasodilatador (VASP)

• A VASP (proteína estimulada por vasodilatador) é uma proteína associada à actina que desempenha um papel crítico na remodelação do citoesqueleto e na polaridade celular, influenciando processos como a orientação axonal, a dinâmica de lamelipódios e filopódios, a ativação plaquetária e a migração celular.
• A VASP promove o alongamento dos filamentos de actina ao proteger as extremidades farpadas (barbed ends) de proteínas de capeamento e facilitar a transferência de monômeros de actina ligados à profilina para as extremidades dos filamentos em crescimento, aumentando assim a dinâmica de polimerização da actina.
• Nas plaquetas, a VASP é um regulador chave da organização da actina e da agregação plaquetária; ela é altamente expressa nas plaquetas e modula os rearranjos citoesqueléticos essenciais para a hemostasia.
• Subcelularmente, a VASP localiza-se em estruturas dinâmicas de actina, incluindo adesões focais, junções estreitas, lamelipódios e membranas de filopódios, refletindo seu papel na adesão e motilidade celular.
• A VASP é uma fosfoproteína sujeita a múltiplos eventos de fosforilação; a fosforilação na Ser157 (o epítopo reconhecido por este anticorpo) é uma modificação bem caracterizada associada a alterações na localização e função da VASP.
• A proteína contém um domínio de homologia 1 Ena/VASP (EVH1), uma região rica em prolina e um domínio EVH2 que medeia a tetramerização e a ligação à actina, permitindo que a VASP atue como uma polimerase de actina processiva.
• Palavras-chave associadas à VASP incluem ligação à actina, junção celular, projeção celular, ligação a SH3 e junção estreita, sublinhando seu papel multifacetado na biologia do citoesqueleto e da adesão celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Ao realizar o Western blot, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar o sinal de fosforilação da S157, uma vez que a desfosforilação pode ocorrer rapidamente após a lise.
• Valide a especificidade do anticorpo comparando os sinais em células estimuladas versus não estimuladas ou tratando as amostras com lambda fosfatase para confirmar a dependência da fosforilação.
• Para aplicações de ELISA, faça o revestimento com o imunógeno de peptídeo fosforilado e verifique a ligação dependente da dose; considere usar um controle de peptídeo não fosforilado para avaliar a especificidade.
• Embora este anticorpo seja recomendado para amostras humanas, a reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; otimize as condições de detecção para cada espécie devido a potenciais variações de sequência.

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